双启动子真核表达载体pVAXAB的构建及应用

双启动子真核表达载体pVAXAB是一种创新的遗传工程工具，由黄小波、邓飞等人在中国科技论文在线上首次发表。这项研究的核心是通过改造原有的载体pVAX1的多克隆位点，将它分隔为两个部分，即pVAXA和pVAXB。这种改造允许两个独立的启动子控制，从而实现了对不同外源基因的精细调控。 构建过程中，研究人员首先设计了两个不同的启动子序列，分别用于驱动DsRed（红色荧光蛋白）和EGFP（绿色荧光蛋白）的表达。这样，他们能够构建出三种质粒：pVAX-DsRed、pVAX-EGFP和pVAX-EGFP-DsRed，其中最后一种质粒同时包含两个荧光蛋白基因。通过将这些质粒转入COS-7细胞进行瞬时转染，研究人员能够直观地观察到双价质粒（如pVAX-EGFP-DsRed）中两种荧光蛋白的表达情况。 实验结果显示，与单价质粒相比，双价质粒中的两种荧光蛋白表达强度相当，没有明显的差异。这证明了双启动子真核表达载体pVAXAB的有效性和稳定性，它可以同时并行表达两个外源基因，为研究和开发双基因疫苗提供了强大的技术平台。 值得一提的是，这项研究得到了国家自然科学基金项目（30901084和31072144）以及高等学校博士学科点专项科研基金的资助，反映出其在学术界的重要性和研究价值。黄小波和邓飞作为并列的第一作者，他们的电子邮件地址为rsghb110@126.com，表明他们都是四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室的研究人员，专注于动物传染病学领域。 黄小波等人构建的双启动子真核表达载体pVAXAB不仅具有重要的科学意义，而且在实际应用中展现出良好的基因表达调控性能，为生物医学研究，特别是基因工程疫苗的开发提供了实用工具。