http://www.paper.edu.cn
-1-
电针刺对创伤大鼠脾 T 细胞 IL-2、IFN-γ 及 ERK 通
路的影响
1
王国年,王坤
哈尔滨医科大学附属第三医院麻醉科,哈尔滨(150081)
E-mail:wangguonian609cn@yahoo.com.cn
摘 要:本文通过观察电针刺对手术创伤大鼠脾脏 T 细胞 IL-2、IFN-γ 和 ERK1/2 信号通路
的影响,探讨其免疫调节的作用机制。方法 32 只 SD 大鼠随机均分为:对照组(Control
组)、单纯电针刺组(EA 组)、创伤组(Trauma 组)和创伤后电针刺组(T + EA 组)。大鼠
麻醉后,沿背部中线、腹部中线行 6 cm 和 5 cm 的纵向切口,暴露腹部脏器 3 min,制作免
疫抑制模型。选双侧“足三里”和“阑尾”穴行电针刺。于术后 3 天无菌取脾,尼龙毛柱法分离
脾 T 淋巴细胞,用 ELISA 和 RT-PCR 法分别检测脾脏 T 淋巴细胞 IL-2、IFN-γ 蛋白和 mRNA
表达;应用 Western-blot 检测 ERK1/2 表达;NF-κB 和 AP-1 活性测定采用 Trans-AM
ELISA-based kits 分析法。结果 与 Control 组比较,Trauma 组脾脏 T 细胞 IL-2 和 IFN-γ 蛋白
和 mRNA 表达明显降低(P < 0.01);与 Trauma
组比较,T + EA 组 IL-2、IFN-γ 蛋白和 mRNA
表达明显增加(P < 0.01)。与 Control 组比较,Trauma 组 p-ERK1/2、NF-κB 和 AP-1 DNA
连接活性明显降低(P < 0.01);与 Trauma 组比较,T + EA 组 p-ERK1/2、NF-κB 和 AP-1 DNA
连接活性明显增加(P < 0.01)。结论 电针刺“足三里”和“阑尾”穴可提高创伤大鼠脾脏 T 细
胞 IL-2、IFN-γ 蛋白和 mRNA 表达,改善术后免疫抑制状态,这种保护作用与 ERK1/2 信号
通路活化有关。推测 ERK1/2 信号通路可能是其免疫调节作用的分子机制。
关键词:电针刺;手术创伤;IL-2;IFN-γ;ERK1/2
中图分类号:R245
1.引言
研究表明电针刺“足三里”和“阑尾”穴能改善手术创伤所致的免疫抑制
[1]
,但该作用的信
号转导机制尚未十分明确。胞外信号调节激酶(extracellular- regulated protein kinase1/2,
ERK1/2)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族一员,是
将信号从细胞表面转导到细胞内部的重要传递者,参与基因表达调控,诱导初始CD4+T细
胞向Ⅰ型辅助性T细胞(helper T cell 1,Th1)或 Th2分化
[2,3]
。因此,本实验从信号转导角度,
探讨电针刺“足三里”和“阑尾”穴对创伤大鼠脾脏T细胞Th1细胞因子(IL-2、IFN-γ)和ERK1/2
信号通路的影响。
2.材料与方法
2.1 动物分组及模型制备
健康雄性 Sprague-Dawley 大鼠,清洁级,体重(200±20)g,购于北京维通利华公司实
验动物中心。饲养在安静环境中,光照与熄灯各 12 h,温度维持在(23±0.5)°C,湿度为
40%~60%。将 32 只大鼠随机分为:对照组(Control 组)、单纯电针刺组(EA 组)、创伤
组(Trauma 组)和创伤后电针刺组(T + EA 组),每组 8 只。各组处理如下:Control 组:
仅麻醉不行手术创伤,与 T + EA 组用同样方法,同样时间点固定,每次 30 min,不行电针
刺;EA 组:与 Control 组处理方法相同,但行电针刺;Trauma 组:于实验第 1 天,建立手
术创伤免疫抑制模型,其它处理同 Control 组,不行电针刺;T + EA 组:于实验第 1 天先造
模,待动物清醒后,行电针刺 30 min。第 2、3 天于同一时间点行电针刺。
1
本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金(项目编号:20060226010)的资助。