2008年复合RT-PCR法建立猪乙脑病毒与猪流感病毒双重检测方法

本研究论文《复合RT-PCR检测猪乙脑病毒和猪流感病毒方法的建立 (2008年)》发表在华南农业大学学报上，作者吕晓丽等人来自河南农业大学牧医工程学院和河南省动物性食品安全重点实验室。研究的核心内容是针对猪乙脑病毒(Japanese Encephalitis Virus, JEV)的E基因和猪流感病毒(Swine Influenza Virus, SIV)的NP基因设计了特异性的引物，旨在建立一种高效且特异的双重检测系统。 研究人员首先从GenBank数据库获取已发表的猪乙脑病毒E基因和猪流感病毒NP基因的序列信息，以此为基础合成了一对针对JEV的引物和一对针对SIV的引物。他们分别开发了针对这两种病毒的单项RT-PCR诊断方法，这种方法能够准确地扩增出JEV的349bp片段和SIV的155bp片段。 经过一系列的扩增条件优化，研究人员成功地将两项单项RT-PCR方法整合，形成了复合RT-PCR诊断法。这一创新的方法允许一次RT-PCR反应即可同时检测两种病毒，显著提高了检测效率。通过实验验证，该复合RT-PCR技术对猪瘟病毒(HCV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)以及正常细胞(PK-15)的核酸扩增结果均为阴性，证明其具有高度的特异性。 该方法的最低检出限分别为JEV的100 pg cDNA和SIV的10 pg cDNA，这意味着它具有很高的敏感度，能够早期发现病毒的存在。这对于猪只健康监控、疾病预防和控制具有重要意义，特别适用于猪乙脑病毒和猪流感病毒的联合检测和鉴别诊断。 此外，文章还提供了中图分类号S858.28，表明这是一项关于兽医学或动物传染病研究的文献，并使用了文献标识码A，表示这是一篇高质量的学术文章。通过文章编号1001-411X(2008)04-0079-04，读者可以追踪到该研究的具体位置和出版情况。 这项研究不仅提供了实用的诊断工具，也展示了在分子生物学领域，特别是病毒检测技术方面的创新和进步，对于提升动物疾病防控水平具有重要价值。