高效血清代谢组学方法：UPLC-QT0FMS在大样本研究中的应用

该研究论文"基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱的高通量血清代谢组学方法"发表于2013年的《高等学校化学学报》第1期，由成玉等人合作完成。作者们致力于开发一种高效的分析手段，以便在大规模生物样本研究中分析血清中小分子代谢物。他们采用UPLC-QT0FMS（超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱）技术，对血清样品的前处理和液质联用分析条件进行了深入优化。 首先，作者考察了不同有机溶剂（如甲醇和乙腈）对血清中蛋白质沉淀的影响，以及对38个标准品化合物的提取效果。实验结果显示，甲醇/乙腈混合物（1:9体积比）能有效去除血清中的蛋白质，且当血清与有机溶剂的体积比至少为1:4时，能得到最佳的沉淀效果，适合大量样本的处理。此外，他们还建议在沉淀过程中将有机溶剂预冷，经过涡旋和超声波处理，以及在加入有机溶剂后冷冻静置，这些步骤可以进一步提升蛋白质和化合物的提取效率。 在液质联用分析方面，作者对不同流动相体系和梯度条件进行了优化，以确保方法的准确性和稳定性。实验结果显示，这种方法具有良好的重现性、精密度和稳定性，能够满足代谢组学研究中大规模样本的需求，每天可处理超过100个血清样本，单个样本分析时间为13分钟。为了验证方法的可靠性和可重复性，作者进行了变异系数分析和主成分分析，这表明该方法在代谢组学研究中具有很高的适用性。 研究背景是针对代谢组学领域的大规模样本分析需求，特别是对于生物样本数量众多的研究项目，如国家“九七三”计划项目（编号：2007CB9）。因此，这项工作不仅提供了实用的血清代谢组学分析方法，也为代谢组学领域的标准化和规模化研究奠定了基础。