大鼠皮层神经元与星形胶质细胞原代培养及OGD模型构建

"大鼠皮层神经元和星形胶质细胞原代培养、鉴定及氧糖剥夺模型的制备" 本文主要介绍了大鼠皮层神经元和星形胶质细胞的原代培养、鉴定技术以及如何建立氧糖剥夺(OGD)模型，这是神经科学研究中的一个重要步骤，用于模拟脑缺血的情况。实验由莽靖、李昕华等人在吉林大学中日联谊医院神经内科进行。 首先，实验者进行了大鼠神经元和星形胶质细胞的原代培养。大鼠神经元在培养至第6天，通过神经特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色，阳性细胞比例达到86.32%±2.64%，这表明大部分细胞为神经元。而星形胶质细胞在培养第9天，利用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色，阳性细胞比例高达98.54%±2.01%，确认了细胞的星形胶质特性。 接下来，为了建立OGD模型，细胞被置于无氧无糖环境中。神经元在OGD 15分钟到30分钟时未显示明显损伤，但随着暴露时间增加至90分钟，神经元出现胞浆空泡，细胞活力下降，180分钟后几乎全部细胞受损。相反，星形胶质细胞在相同条件下未受显著影响，表明它们对缺氧环境的耐受性更强。 此外，实验还通过台盼蓝染色和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率检测评估了细胞损伤程度。随着OGD时间延长，神经元和星形胶质细胞的LDH漏出率逐渐增加，提示细胞损伤加重。当OGD达到60分钟时，神经元和星形胶质细胞的LDH漏出率显著上升，表明细胞膜通透性增加，细胞损伤严重。 这些结果表明，实验成功地建立了大鼠皮层神经元和星形胶质细胞的OGD模型，这为后续研究星形胶质细胞在缺血性损伤中的保护作用提供了实验基础。此模型可以用来探究星形胶质细胞如何在缺血过程中保护神经元，以及可能的保护机制，对于理解脑保护策略具有重要意义。 关键词: 原代培养、氧糖剥夺、神经元、星形胶质细胞 该研究的创新点在于同时培养和鉴定神经元与星形胶质细胞，并通过OGD模拟了脑缺血状态，为后续的神经保护研究提供了可靠的技术平台。实验方法严谨，数据详实，为理解星形胶质细胞在缺血性损伤中的角色以及寻找潜在的治疗靶点提供了重要线索。