番茄抗根结线虫病品种鉴定：锚定引物扩增DNA标记法研究

"锚定引物扩增多态性DNA分子标记鉴别番茄抗根结线虫病品种的研究 (2013年)" 该研究聚焦于使用分子生物学技术鉴别番茄品种对抗根结线虫病的抗性。研究者选择了抗病材料Ryau96172I和感病材料Rutagus作为对照，并对其他待鉴定的番茄品种进行实验。他们依据已知的抗线虫基因Mi-1.2和Mi-1.1设计了特异性引物，这些引物在DNA分子中的作用是启动和引导DNA复制过程。 实验过程中，研究人员采用了改良的SDS法来提取番茄的基因组DNA，这是一种常用的DNA提取方法，通过破坏细胞并溶解蛋白质，从而纯化DNA。接着，他们运用锚定引物扩增多态性DNA分子标记（APAPD）技术来鉴定不同番茄品种间的遗传差异。这种方法依赖于特定引物与DNA模板的结合，通过PCR(聚合酶链式反应)扩增，产生可观察的多态性片段，这些片段的差异可以反映出不同品种间的遗传特性。 在生物测定部分，研究者用爪哇根结线虫虫卵接种25天大的番茄幼苗，以5000粒/株的比例进行，这模拟了实际的病害侵染情况。接种后，通过对植株的观察和分析，确定了抗病、中抗和高感的材料。结果显示有2份材料表现出抗病性，2份中抗，5份高感。 在分子标记方面，研究者优化了APAPD反应体系的退火温度，发现38℃是最适宜的条件。通过这个体系，他们筛选出一条具有特异性的引物SF30，该引物能产生408bp的特异片段。这一特异性引物的发现对于区分不同抗性品种具有重要意义，因为它能提供一种快速、准确的鉴别方法。 这项研究揭示了锚定引物扩增多态性DNA分子标记技术在鉴定番茄抗根结线虫病品种中的潜力，优化的实验条件和特异性引物SF30的开发，为番茄育种和病害防控提供了新的工具。同时，实验结果与生物测定相吻合，进一步证实了该分子标记技术的可靠性。这一研究对于未来筛选和培育抗病番茄品种具有重要的理论和实践价值。