宁夏大学研究：SHV-12型ESBLs的原核表达与免疫原性鉴定

本文主要探讨了SHV-12型超广谱β-内酰胺酶的原核表达及其免疫原性分析。研究通过PCR技术首先成功地扩增了SHV-12型ESBLs的目的基因，这是一种能分解多种抗生素的酶，特别是在亚洲地区如中国广泛存在。目标基因被亚克隆到了表达载体pET-28a（+）上，形成了重组质粒pET-28a-SHV-12，然后导入到大肠杆菌BL21（DE3）表达菌株中进行诱导表达。 经过蛋白质纯化后的SHV-12 ESBLs，其相对分子质量被确定为30千Dalton。通过蛋白质印迹技术确认了表达出的蛋白具有特异性的条带，这表明实验成功地得到了活性的超广谱β-内酰胺酶。进一步的实验通过头孢硝基噻吩显色反应验证了这种酶确实具有酶活性。 为了评估这种酶作为免疫原的效果，研究人员将其包涵体作为抗原免疫Balb/c小鼠。经过三次免疫后，通过间接ELISA法测定，免疫效价达到了惊人的1:106，这表明所获得的免疫原具有高度的稳定性和可靠性，能够有效激发小鼠的免疫反应。 该研究的重要性在于它不仅提供了SHV-12型ESBLs的基因工程表达方法，还为开发针对这类耐药酶的诊断和治疗策略提供了基础。了解和控制这种酶的分布与活性对于抗生素耐药性问题的防控至关重要。同时，通过免疫学方法制备的抗SHV-12 ESBLs抗体，可能有助于设计新型疫苗或诊断试剂，以应对日益严重的抗生素耐药性威胁。