HPLC-MS法测定促性腺激素释放激素:GT1-7细胞研究

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"高效液相色谱-质谱联用法测定促性腺激素释放激素" 本文主要探讨了一种高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)技术,用于测定促性腺激素释放激素(GnRH)的含量。GnRH是一种由下丘脑分泌的神经激素,对于脊椎动物的生殖系统具有关键的调节作用。由于GnRH的分子结构复杂,稳定性较差,以及其在体内的分泌浓度较低,因此在科研中对其进行精确的定性和定量检测是一项挑战。 实验中,研究者利用GT1-7细胞作为模型,这是一种模拟下丘脑神经元功能的细胞系,能分泌GnRH。在收集了GT1-7细胞的分泌上清液后,采用0.1%乙酸-乙腈作为流动相,通过InertSustain C18色谱柱进行分离。在正离子离子化模式下,利用多反应监测(MRM)方式进行检测,确保了GnRH的精准鉴定和定量。 该方法的最低定量限(LOQ)达到了0.2ng/mL,表明其具有很高的灵敏度。标准曲线的线性范围为1.0-250.0ng/mL,相关系数(r)大于0.99,显示了良好的线性关系。日内和日间的精密度(RSD)均小于15%,说明方法的重复性良好。此外,方法的回收率在94.5%~97.8%之间,进一步验证了其准确性。 关键词包括生殖科学、GnRH、液相色谱-质谱联用法以及GT1-7细胞,表明这项研究专注于生殖生理学领域的分析技术。通过这种方法,可以有效地分析GT1-7细胞分泌上清液中的GnRH浓度,为理解和研究GnRH的作用机制提供了可靠的定量工具。 该研究得到了高等学校博士学科点专项科研基金的支持,作者丁洁是一名从事生殖毒理学研究的博士生,而通信联系人韩晓冬教授则是该领域的专家,专注于生殖毒理学和干细胞生物学研究。此篇论文的发表,不仅展示了高效的分析技术,也为GnRH的相关研究提供了新的实验手段和理论依据。