"肉仔鸡肠道B淋巴细胞Ca2+浓度流式细胞术测定方法的建立 (2011年)" 这篇论文主要关注的是在肉仔鸡肠道B淋巴细胞中,如何利用流式细胞术(Flow Cytometry)来测定细胞内的Ca2+浓度。流式细胞术是一种广泛应用的细胞分析技术,它可以高速、定量地分析单个细胞的物理和化学特性,包括细胞内离子浓度。 研究者首先介绍了实验的目的,即建立一种结合流式细胞术和荧光染料Fluo-3-AM的测定方法,用于测量肉仔鸡肠道B淋巴细胞内的Ca2+水平。他们通过分离和培养21天大的肉仔鸡肠道B淋巴细胞,使用不同浓度的脂多糖(LPS)作为刺激剂,以此来观察和评估B淋巴细胞的刺激指数(SI),以确定促使细胞增殖的最佳LPS浓度。通过这种方式,他们构建了一个肉仔鸡B淋巴细胞体外增殖试验模型。 接下来,研究者选用最佳浓度的LPS刺激细胞72小时,然后采用Fluo-3-AM作为钙离子指示剂。Fluo-3-AM是一种荧光探针,当与细胞内的Ca2+结合后,其荧光强度会增强,从而可以用来定量检测细胞内的Ca2+浓度。通过流式细胞仪,他们成功地建立了测定肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度的方法。 在实验结果部分,研究者发现LPS的最佳浓度为10μg/mL,这能有效刺激B淋巴细胞增殖。同时,他们还探究了二十碳五烯酸(EPA),一种多不饱和脂肪酸,对B淋巴细胞内Ca2+浓度的影响。结果显示,EPA显著降低了细胞内的Ca2+浓度,这一发现可能揭示了EPA对B淋巴细胞功能的潜在影响。 总结来说,这篇论文建立了一种新的生物分析技术,用以研究肉仔鸡肠道B淋巴细胞的钙离子动态,这对理解免疫反应和细胞信号转导过程具有重要意义。同时,它还指出EPA可能通过调节细胞内Ca2+水平影响B淋巴细胞的功能,这为畜牧业中改善动物健康和免疫力提供了新的思路。关键词包括:流式细胞术、二十碳五烯酸(EPA)、B淋巴细胞和Ca2+浓度。
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