海藻化感对海洋原甲藻光合机构的影响

© 2013年。由爱思唯尔公司出版信息工程研究院负责评选和同行评议可在www.sciencedirect.comwww.sciencedirect.com上在线获取ScienceDirectIERI Procedia 5（2013）209 - 2152013年农业与自然资源工程国际会议细基江蓠对海洋原甲藻光合机构的化感作用叶长鹏 *，张暨南大学水生生物研究所，广东省教育厅富营养化与赤潮控制重点实验室，广东摘要在控制的室内条件下，将引起赤潮的海洋原甲藻（Prorocentrum micans）与不同克数的剪下的大型海藻细基江蓠（Gracilaria tenuistipitata）（红藻门）在共存培养系统中共培养3天，以表征海藻对海洋原甲藻光合作用的缓解作用。在初始光照阶段，光合生物荧光瞬变的多相上升相被称为OJIP。本研究通过对海洋假单胞菌叶绿素a的瞬时荧光曲线及其相关参数的精确跟踪，并在JIP参数测试的基础上进行了澄清，以分析光系统II的活性。研究了干燥G. tenuistipitata上的蛋白质含量明显与克重和时间相关。Chla荧光特异性参数遵循与O-J-I-P曲线相同的模式。根据瞬态荧光曲线及其相关参数，确定了G.对海洋假单胞菌光合器官的影响主要表现为光系统反应中心活性数的减少和电子传递链的阻断。结果表明，G.细基藻菌体对海洋拟青霉光合作用有明显的抑制作用，表明细基藻菌体是潜在的杀藻剂来源。用于对抗引起赤潮的海洋原甲藻。© 2013作者。由爱思唯尔公司出版 在CC BY-NC-ND许可下开放访问。信息工程研究院负责评选和同行评议关键词：赤潮;江蓠;海洋原甲藻;化感作用; JIP检验* 通讯作者。电话：+ 8615521332748;传真：+8602085220239电子邮箱：tcpyes@jnu.edu.cn。2212-6678 © 2013作者由爱思唯尔公司出版 在CC BY-NC-ND许可下开放访问。信息工程研究所负责的选择和同行评审doi：10.1016/j.ieri.2013.11.094210Changpeng Ye和Mengcheng Zhang / IERI Procedia 5（2013）2091. 介绍城市化、水产养殖和人为排放导致许多河口和沿海水域，特别是发达地区的营养物富集（即富营养化）（Anderson等人，2008年）。富营养化和随之而来的微藻的爆炸性生长，无论是有毒还是无毒的形式，被称为赤潮或有害藻华（HABs），在最近的二十到三十年中被认为是沿海水域中的关键生态问题（Heisler等人，2008; Lewitus等人，2012年）。海洋原甲藻（Prorocentrum micans），能够形成水华，是一种有害生物物种，并且可以导致贝类死亡（Wang et al.，1998年）。为了控制和/或减轻有害藻华，可以采用不同的物理方法，例如遮光和太阳紫外线辐射（Sugawara等人，2003; Chen等人，2009）和化学方法（Sun和Choi，2004; Lee等人，2008年）已经开发。然而，由于生态和成本考虑，上述方式的大规模应用受到限制（Wang等人，2009年）。使用大型藻类的生物控制，例如孔石莼和江蓠，被发现能够有效地削弱有害生物，并且也是海洋环境固有的，具有容易聚集、成本低和环境友好的其他优点（Jin和Dong，2003; Tang和Golber，2011; Wang等人，2012年）。G. tenuistipitata广泛分布于半咸水地区，是一种用于琼脂、生物活性物种和水产养殖饲料添加剂的有用的大型植物（Xu和Gao，2008; Zheng和Gao，2009; Qi等人，2010; Yeh等人，2012年）。已经2007; Nan等人，2008; Oh等人，2010年）。通过改变优势物种和减少浮游植物丰度，大型藻类可以减轻赤潮的有害影响，选择性地重组浮游植物群落（Zhou et al.，2006;Ye等人，2012年）。与直接使用新鲜的大型藻类菌体来控制和/或减轻赤潮相比，使用大型藻类提取物或干粉更具有优势，因为它们的浓度在应用中容易控制，因此更安全。然而，很少有人知道的配置文件的光合作用抑制有害生物的干海藻。在本研究中，我们使用共存培养系统来阐明干G。tenuistipitata。这些模式的特征可以解释使用干燥G。tenuistipitata作为潜在的杀藻剂源，对引起赤潮的海洋假单胞菌具有一定的抑制作用。2. 材料和方法2.1. 大孢子虫的采集地点和预培养2012年9月，G. tenuistipitata采自中国广东珠海横琴岛。用过滤的海水立即冲洗大球藻，以从菌体表面清除不需要的物质，然后预培养驯化约一周。预培养条件为：光照强度40 molphotons·m2·s-1，温度20 ± 0.1°C，日节律性12 h。2.2. G.预培养后在室内用7 μ molL-1 NaH2 PO4和100 μ molL-1 NaNO3进行富集培养一周后，与微生物进行共培养实验。培养条件为：光照强度70 molphotons·m2·s-1，温度20 ± 0.1°C，夜间节律12 h。Changpeng Ye和Mengcheng Zhang / IERI Procedia 5（2013）2092112.3. P的文化。海洋原在与G. tenuistipitata。最终培养基的盐度为30‰，pH为8.0。每天用手摇动含有海洋假单胞菌的烧瓶两次。使微生物保持生长至指数期以用于共培养实验。在500 ml三角瓶中，将一定体积的海洋假单胞菌接种于350 ml海水中，用f/2培养基进行增菌。微生物制剂的初始浓度为1 × 10 ~4/ml。2.4. 共培养试验表明，P.micans和干G.特努伊斯蒂皮塔唐以G.细基海蜇的鲜海蜇先用过滤海水漂洗除盐，然后风干。通过剪切将干燥样品破碎，将最终生物质设定为0、1.0、2.0和3.0 g干重/升。不同生物量的剪切G。在烧瓶中将细基真核生物与海洋假单胞菌共培养。对照是单一培养物，只有微量的P. micans.共培养实验进行3天，重复三次。2.5. 叶绿素荧光的测定及JIP试验在共培养实验期间，通过植物效率分析仪（Hansatech Instruments，England）跟踪海洋假单胞菌中Chla的荧光瞬态。测量前，所有样品应在黑色袋中暗适应15分钟。在初始光照下由产氧光合生物体显示的荧光瞬变的多相上升相被命名为OJIP（Strasser等人，1995年; Reynroth等人，2001年）。关于叶绿素荧光测定和JIP试验的详细信息可参考Ye等人（2012）的论文。本研究利用海洋假单胞菌的OJIP曲线和RC/Cso（t=0时，单位激发截面光系统反应中心的活性数）、Fv/Fm（PSII最大光化学效率）和ETo/Cso（t=0时，单位激发截面的电子传递通量）三个相关参数来评价干燥的海洋假单胞菌G对海洋假单胞菌的控制效果。tenuistipitata对小球藻光合器的影响。 micans。2.6. 数据统计分析数据统计采用SPSS13.0中的单因素方差分析，P0.05为显著性。3. 结果干燥的G. tenuistipitata对海洋原甲藻具有强烈的刺激或杀藻作用，这取决于干燥的大球藻的生物量（图11）。①的人。212Changpeng Ye和Mengcheng Zhang / IERI Procedia 5（2013）209对照品1g2g3g-60AB C70120100608050604040302014012010080604020二十四1010-201001010-410-201010-610-410-2100时间（秒）Fig. 1.海洋假单胞菌的OJIP谱与干燥的G. tenuistipitata在三天的实验中（A，第一天; B，第二天; C，第三天）。在第1天，1g和2g干G.细背飞虱对小鼠的抑制作用（

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