硫乳霉素衍生物的合成、表征及抗真菌活性研究

工程6（2020）560研究绿色植保创新-文章硫乳霉素衍生物的合成、表征及抗真菌活性研究吕培a，#，陈一良a，#，王大伟b，吴向伟a，秦X。Lib，c，RimaoHua，安徽农业大学资源与环境学院，安徽省农业食品安全重点实验室，合肥，230036b南开大学化学学院元素有机化学国家重点实验室，天津300071c分子生物科学和生物工程系，夏威夷大学马诺阿分校，檀香山，HI 96822，美国阿提奇莱因福奥文章历史记录：2018年12月23日收到2019年7月20日修订2019年10月8日接受2020年4月1日网上发售保留字：3-酰基硫代特窗酸杀菌剂定量A B S T R A C T5-取代的亚苄基3-酰基硫代特窗酸是抗真菌的。根据3-酰基硫代内酯与C171 Q KasA蛋白的结合方式，设计、合成并表征了一系列5位不同取代的3-酰基硫代特窗酸衍生物。以苹果腐烂病菌、新月弯孢菌、禾谷镰刀菌和尖孢镰刀菌为供试菌，对化合物进行了杀菌活性筛选。番茄叶锈菌结果表明，大多数目标化合物在浓度为50lg·mL-1时对目标真菌具有较好的杀菌活性。化合物11c和11i显示出最高的活性和广谱性。11 c和11 i对供试真菌的EC50值分别为1.9-10.7和3.1- 7.8lg·mL-1，而11 c和11 i对供试真菌的EC 50值分别为1.9-嘧菌酯、多菌灵和氟吡菌酰胺对V.Mali，分别为6.7，41.7和0.18lg·mL-1。lunata，分别为22.4，0.42和0.43lg·mL-1。对禾谷镰刀菌的抑制率分别为4.3，0.12和> 50 lg·mL-1。oxysporum F.番茄叶锈菌对目标化合物的结构和抗念珠菌活性进行了研究。结果表明，比较分子场分析（CoMFA）模型具有较高的 预测能力（q2= 0.9816，r2= 0.80 6 0），验证了其可靠性5-位亚苄基上的不同取代基对活性有显著影响，而在亚苄基苯环上引入卤素原子能提高对供试真菌的活性。©2020 THE COUNTORS.由爱思唯尔有限公司代表中国工程院和高等教育出版社有限公司出版。 这是一篇CCBY-NC-ND许可（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。1. 介绍真菌疾病越来越被认为是对粮食安全、农作物破坏和改变森林生态系统动态的全球性威胁[1为防范真菌病原体，自20世纪60年代以来，大量既经济又高效的合成杀菌剂被提供用于作物保护，并在满足因人口快速增长而飙升的粮食需求方面发挥了不可或缺的作用。然而，由于重复使用具有相同或相似作用模式的杀真菌剂，出现了杀真菌剂抗性的快速增加，导致作物中真菌病害控制的失败[4，5]。同时，随着杀菌剂的使用，非目标和环境危害也随之出现[6，7]。因此，我们认为，*通讯作者。电子邮件地址：rimaohua@ahau.edu.cn（R. Hua）。#这些作者对这项工作做出了同样的仍然需要开发用于作物真菌病害防治的更新的杀真菌剂。脂肪酸是真菌生存所必需的，并且是真菌细胞壁中最丰富的组分之一;它们作为膜生物合成的脂质的充足供应而发挥作用，这涉及调节活性位点之间的底物并增加中间体的局部浓度[8长链C60-大多数细菌、真菌和植物具有脂肪酸合成酶（FAS）II型系统，其中解离酶由单独的基因编码，而在哺乳动物中，脂肪酸合成过程由高度整合的FAS I型多酶系统进行，该系统与FAS II酶复合物显著不同[12]。因此，FAS II酶是开发新的抗分枝杆菌和抗疟疾药物的有吸引力的靶标。硫代乳霉素（TLM）是一种硫代内酯抗生素，是一种已知的可解离FAS II酶抑 制剂，通 过抑制 b- 酮脂 酰-酰基 载体蛋白 （ ACP ）酶（Kases）[13，14]。在https://doi.org/10.1016/j.eng.2019.10.0162095-8099/©2020 THE COMEORS.由爱思唯尔有限公司代表中国工程院和高等教育出版社有限公司出版。这是一篇基于CC BY-NC-ND许可证的开放获取文章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。可在ScienceDirect上获得目录列表工程杂志主页：www.elsevier.com/locate/engP. Lv等人/工程6（2020）5605611●1●近年来，已经发现许多含有硫内酯部分的化合物对许多病原菌和分枝杆菌表现出显著的生物活性[15，16]。还发现TLM及其衍生物显示出抗疟疾活性[17，18]和抗结核活性[19]。此外，我们之前已经证明3-酰基硫内酯通过抑制FAS活性而作为有效的抗植物病原体剂[20]。如图1所示，提供三个氢键和与Kas中特定氨基酸残基相互作用的疏水尾部的化学结构对于抑制效力至关重要鉴于这种分子间的相互作用，通过对硫代内酯的取代基进行修饰，开发新型3-酰基硫代内酯衍生物，用于筛选高效杀菌剂具有重要意义。因此，设计并合成了28种在5位具有不同亚苄基取代基的新的3-酰基硫代特窗酸衍生物（化合物1- 12 a参见补充数据图S1）;由于3-酰基硫代内酯与蛋白质C171 Q KasA的结合位，这些衍生物预期表现出杀真菌活性（图S1）。 1）和硫内酯的已证实的活性基团[13-20] 。 此 外 ， 使 用 SYBYL 软 件 包 中 实 施 的 比 较 分 子 场 分 析（CoMFA）方法开发预测性三维（3D）定量本研究还基于3D-QSAR分析预测了具有潜在抗真菌活性的硫代特窗酸衍生物的取代基2.2. 合成2.2.1. 用于合成化合物6a在 0 ℃ 下 ， 将 4- 羟 基 苯 甲 醛 （ 0.5g ， 0.0041mol ） 、 酸（0.0045mol）和4-二甲基氨基吡啶（DMAP; 0.5g，0.0041mol）溶解于二氯甲烷（30 mL）中。向该溶液中滴加1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺（EDC; 1.2g，0.0062mol）的二氯甲烷（10mL）溶液。然后将混合物在室温下搅拌12小时，通过TLC检测。反应完成后，通过旋转蒸发除去二氯甲烷。将粗产物用乙酸乙酯溶解，用饱和NaHCO3水 溶 液和H2O洗涤，经MgSO4干燥，过滤，然后浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法（石油醚/乙酸乙酯（PE/EA）= 8：1）纯化，得到6a● 4-乙酸甲酰基苯酯（6a）。无色油状物;产率80.4%; 1H NMR（600 MHz，CDCl3）d：9.98（s，1H），7.9313C NMR（150MHz，CDCl3）d：190.89，168.68，155.30，133.96，131.19，122.35，和21.14; HR-MS（ESI）：C9H8O3计算的质荷比（m/z）（[M+H]+）：165.0552;实测值：165.0554。● 丙酸4-甲酰基苯酯（6 b）。无色油状物;产率85.6%; 1H NMR（600 MHz，CDCl3）d：9.97（s，1H），7.90（d，J= 8.5 Hz，2H），7.26（d，J= 8.6 Hz，2 H），2.61（q，J= 7.5 Hz，2 H），和1.26（t，J= 7.5 Hz，3 H）。13C匪R（150 MHz，CDCl3）d：190.92，172.22，155.46，133.87，131.17，122.32，27.75，和8.92; HR-MS （ ESI ） ： C10H10O3 的 m/z 计 算 值 （ [M+H]+ ） ：179.0708;实测值：179.0710。1·己 酸 4-甲酰基苯酯（6c）。无色油状物，收率83.4%;2. 材料和方法2.1. 一般信息在使用前，将所有无水溶剂干燥并通过标准技术纯化。1H核磁共振（NMR）和13CNMR光谱在Agilent DD2 NMR光谱仪（600 MHz，Agilent Technologies，Inc.，USA），用四甲基硅烷作为内标。相对于作为内标物的残留溶剂线测量化学位移，单位为ppm（d）。当报告峰多重性时，使用以下缩写：单峰（s）、双峰（d）、双峰的双峰（dd）、三重峰（t）、多重峰（m）、四分之一峰（q）。使用瓦里安四元数傅里叶变换（QFT）-电喷雾电离（ESI）仪器测定高分辨率质谱（HR-MS）数据。熔点（m.p.）在XT4MP装置（Taike Corp.，中国）和温度计没有得到纠正。在硅胶GF 254上进行分析型薄层色谱法（TLC）。使用硅胶进行柱色谱纯化。1H NMR（600 MHz，CDCl3）d：9.97（s，1H），7.90（d，J= 8.4Hz，2H），1H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.26（d，J= 8.3Hz，2H），2.57（t，J= 7.5Hz，2H），1.811.4613CNMR（150 MHz，CDCl3）d：190.84，171.52，155.48，133.89，131.13，122.32、34.32、31.18、24.46、22.25和13.85; HR-MS（ESI）：C13H16O3的m/z计算值（[M+H]+）：221.1178;实测值：221.1180。4-氟苯甲酸4-甲酰基苯基酯（6d）。白色固体;收率85.4%; m.p.991H NMR（400MHz，DMS0-d6）S8.2819（t，J= 8.3Hz，2H）。13C NMR（150 MHz，CDCl3）d：190.82、167.21、165.51、163.47、155.49、134.14、132.91、131.24、125.15、122.45、116.03和115.88; HR-MS（ESI）：m/z计算值：C14H9F03（[M+H]+）计算值：245.0614;实测值：245.0618。4-氯苯甲酸4-甲酰基苯基酯（6 e）。白色固体;收率86.7%; m.p.1111H），8.13（d，J= 8.6Hz，2H），7.97（d，J= 8.5Hz，2H），7.50（d，J = 8.55Hz，2H）和7.40（d，J= 8.5Hz，2H）。13CNMR （ 150 MHz ， CDCl3 ） d ： 190.83 ， 163.63 ， 155.40 ，140.62，134.17，131.61，131.27，129.10、127.33和122.43; HR-MS（ESI）：m/z计算值：C2 H22 N2O3。C14H9ClO3（[M+H]+）：261.0318;实测值：261.0322。562P. Lv等人/工程6（2020）560Fig. 1. TLM（左）、3-乙酰基硫代特窗酸铅（中）和预测的3-乙酰基硫代特窗酸在与C171 Q KasA酶的复合物中的对接位姿（右）（蛋白质数据库（PDB）：4c 6 u）。P. Lv等人/工程6（2020）560563●●●111● 4-4-溴苯甲酸甲酰基苯基酯（6 f）。 ·4-甲酰基苯甲酸丁酯（8 e）。无色油状物;收率89.4%; 1H91.5%; m.p.1121H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ 8.05（d，J= 8.5Hz，2H），7.97 （ d ， J= 8.5Hz ， 2H ） ， 7.67 （ d ， J = 8.5Hz ， 2H ）5Hz，2H）和7.40（d，J= 8.5Hz，2H）。13CNMR（150 MHz，CDCl3）d：190.81，163.78，155.39，134.18，132.10，131.68，131.26，129.34、127.80和122.42; HR-MS（ESI）：m/z计算值：C2 H22 N2O3。C14H9BrO3（[M+H]+）：304.9813;实测值：304.9814。● 4-4-甲基苯甲酸甲酰基苯酯（6 g）。 白色固体;产率NMR（600 MHz，CDCl3）d：10.08（s，1H），8.17（d，J= 8.2 Hz，2H），1H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.93（d，J= 8.1Hz，2H），4.34（t，J= 6.6Hz，2H），1.791.5113CNMR（150 MHz，CDCl3）d：191.67，165.60，139.02，135.44，130.10，129.46、65.45、30.65、19.21和13.71; HR-MS（ESI）m/z计算值：C12H14O3（[M+H]+）计算值：207.1021;实测值：207.1022。● 4-甲酰基苯甲酸辛酯（8 f）。无色油状物;产率79.6%; 1H86.9%; m.p.1121H），8.08（d，J 1H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ：7.96（d，J =8.2Hz，2H），7.96（d，J = 8.2Hz，2H）， = 8.6Hz，2H），7.40（d，1HNMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.32（d，J= 8.5Hz，2H）和2.46（s，3H）。13C NMR（150 MHz，CDCl3）d：190.97，164.53，155.78，144.97，133.95，131.23、130.30、129.42、126.10、122.56和21.79; HR-MS（ESI）：m/z计算值C15H12O3（[M+H]+）：241.0865;实测值：241.0868。4-4-（三氟甲基）苯甲酸甲酰基苯酯（6 h）。白色固体;产率79.8%;m.p.85-86 ℃; 1H NMR（600 MHz，CDCl 3）d：10.03（s，1H），8.32（d，J = 8.1 Hz，2 H），7.99（d，J = 8.5 Hz，2 H），7.80（d，J= 8.2 Hz，2 H），和7.42（d，J = 8.4 Hz，2 H）。13CNMR（150MHz，CDCl3）d：190.83，163.32，155.21，135.50，135.29，134.31、132.13、131.33、131.11、130.66、125.75、124.34、122.53、34; HR-MS（ESI）：m/z计算值C15H9F3O3（[M+H]+）：295.0582;实测值：295.0587。4-甲酰基苯基4-甲氧基苯甲酸酯（6 i）。白色固体;收率89.8%; m. p.951H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ 8.14（d，J= 8.7Hz，2H），7.95（d，J= 8.4Hz，2H），7.39（d，J = 8.3Hz，1H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7·99（d，J= 8.7Hz，2H）和3.89（s，3H）。13C NMR（150 MHz，CDCl3）d：190.95，164.18，155.85，133.89，132.42，131.20，122.57，121.10,113.97,和55.54;HR-Ms(ESI)：M/z计算C15H12O4（[M+H]+）：257.0814;实测值：257.0816。2.2.2. 制备化合物8a在 0 °C 下 ， 将 4- 甲 酰 基 苯 甲 酸 （ 0.5g ， 0.0033mol ） 、 醇（0.0030mol）和DMAP（0.4g，0.0033mol）溶解于二氯甲烷（30mL）中。向该溶液中滴加在二氯甲烷（10mL）中的EDC（1.0g，0.0050mol）然后将混合物在室温下搅拌12小时，通过TLC检测反应完成后，通过旋转蒸发除去二氯甲烷将粗产物用乙酸乙酯溶解，用饱和NaHCO3水溶液和H2O洗涤，经MgSO4干燥，过滤，然后浓缩。通过硅胶柱色谱法（PE/EA = 15：1）纯化残余物，得到8a4-甲酰基苯甲酸甲酯（8a）。白色固体;产率91.1%;m.p.58IHz，2H）和3.94（s，3H）。13C NMR（150 MHz，CDCl3）d：191.61，166.02，139.09，135.04，130.15，129.48和52.55; HR-MS（ESI）m/z 对于C9H8O3（[M + H]+）+H]+）：165.0552;实测值：165.0551。● 4-甲酰基苯甲酸乙酯（8b）。无色油状物;产率81.9%; 1HNMR（600 MHz，CDCl3）d：10.08（s，1H），8.2013C NMR（ 150 MHz ，CDCl3） d： 191.69 ， 165.55 ， 139.02 ，135.41 ，130.08，129.50，61.59，和14.23; HR-MS（ESI）m/zC10H10O3计算值（[M+H]+）：179.0708;实测值：179.0709。● 4-甲酰基苯甲酸异丙酯（8 c）。无色油状物;产率83.7%; 1HNMR（600 MHz，CDCl3）d：10.08（s，1H），8.16（d，J= 8.2Hz，2 H），7.92（d，J= 8.4 Hz，2 H），5.29-5.22（m，1H），和1.37（d，J = 8.2 Hz，2 H），J= 6.3Hz，6H）。13C NMR（ 150 MHz ，CDCl3 ）d： 191.65 ， 165.00 ， 138.97 ， 135.85，130.02 ， 129.39 ， 69.19 ， 和 21.84; HR-MS （ ESI ） m/z 计 算 值C11H12O3（[M+H]+）：193.0865;实测值：193.0868。● 4-甲酰基苯甲酸丙酯（8d）。无色油状物，收率83.1%;H564P. Lv等人/工程6（2020）560●●●●NMR（600 MHz，CDCl3）d：10.09（s，1H），8.18（d，J= 8.2 Hz，2H），7.94（d，J= 8.3Hz，2H），4.34（t，J= 6.7Hz，2H），1.811.5013CNMR（150 MHz，CDCl3）d：191.58，165.58，139.06，135.49，130.10，129.44、65.75、31.74、29.16、28.62、25.97、22.59和14.03; HR-MS（ESI）：m/z计算值C16H22O3（[M+H]+）：263.1647;实测值：263.1650。4- 甲 酰 基 苯 甲 酸 苄 酯 （ 8 g ） 。 白 色 固 体 ; 产 率 73.8%;m.p.43-44 ℃; 1H NMR （ 600 MHz ， CDCl 3 ） d ： 10.09 （ s ，1H），8.22（d，1H）1HNMR（400MHz，DMS0-d6）δ7.94（d，J= 8.1Hz，2H），7.45（d，J= 7.3Hz，2H），7.401H NMR （400MHz，DMS0-d6）δ 7·36（t，J= 7.2Hz，lH ） ， 5.39 （ s ， 2H ） 。 13CNMR （ 150 MHz ， CDCl3 ） d ：191.60，165.37，139.18，135.51，135.06，130.29、129.50、128.68、128.49、128.33和67.30; HR-MS（ESI）m/z计算值C15H12O3（[M+H]+）：241.0865;实测值：241.0866。2.2.3. 化合物9a将158 mg（1 mmol）3-乙酰基噻吩-2，4（3H， 5H）-二酮（4）和适当取代的芳族醛（1.1mmol）在50 mL含有p-TsOH（30 mg，0.17 mmol）回流，共沸除去水，并通过TLC检测将混合物冷却至室温，沉淀5-取代亚苄基3-酰基硫代特窗酸（即，9a-乙酸4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）甲基）苯酯（9a）。黄色固体;产率70.9%; m.p.192- 193 ℃;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）d：7.81（s，1H），7.61（d，1H）1HNMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.21（d，J= 8.6Hz，2H），2.61（s，3H），2.32（s，3H）。13C NMR（150 MHz，CDCl3）d：197.57，187.14，168.94，152.17，133.50、132.31、131.62、131.29、126.07、122.45、116.34、108.59、25.69和21.15; HR-MS（ESI）m/z计算值C15H12O 5S（[M + H]+）。+H]+）：305.0484;实测值：305.0485。丙酸4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）甲基）苯酯（9 b）。黄色固体;产率65.7%; m.p.167-168 ℃; 1HNMR（600 MHz，CDCl 3）d：7.80（s，1H），7.61（d，1H）1HNMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.21（d，J= 8.6Hz，2H），2.6413C NMR（150 MHz，CDCl3）d：197.58，187.14、172.46、152.33、132.31、131.70、131.16、125.95、122.43、108.59、27.76、25.70和8.96; HR-MS（ESI）m/z 计算C16H14O5S（[M+H]+）：319.0640;实测值：319.0642。己酸4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）甲基）苯基酯（9 c）。黄色固体;产率66.8%; m.p.124-125 ℃; 1HNMR（600 MHz，CDCl 3）d：7.81（s，1H），7.61（d，1H）1HNMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7·20（d，J= 8.5Hz，2H），2.61（s，3H），2.57（t，J = 8.5Hz，1H NMR （ 400MHz ， DMS0-d6 ） δ 1.8113C NMR （ 150 MHz ，CDCl3）d：197.54，187.12、171.77、152.35、132.28、131.67、131.16、125.98、122.45、108.59、34.34、31.21、25.66、24.51、22.27和13.87; HR-MS（ESI）m/z计算值C19H20O 5S（[M+H]+）：361.1110;实测值：361.1112。●4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5H）-亚基）NMR（600 MHz，CDCl3）d：10.09（s，1H），8.201H NMR（400MHz，DMS0-d6） δ 4·31（t，J= 6.7Hz，2H），1.8313C NMR（150 MHz，CDCl3）d：191.68，165.60、139.03、135.45、130.11、129.47、67.14、22.01和10.46;HR-MS（ESI）m/z计算值C11H12O3（[M+H]+）：193.0865;实测值：193.0868。甲基）苯基4-氟苯甲酸酯（9d）。黄色固体;产率65.4%; m.p.191 -192 ℃; 1H NMR（600 MHz，CDCl 3）d：8.22（dd，J = 8.4，5.5 Hz，2 H），7.84（s，1H），7.67（d，J = 8.4，5.5 Hz，2H），7.67（d，J = 8.4，5.5 Hz，2 H）= 8.4Hz，2H），7.34（d，1HNMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.20（t，J= 8.5Hz，2H）和2.62 （ s ， 3H ） 。 13C NMR （ 150 MHz ， CDCl3 ） d ： 197.53 ，187.12，167.17，165.47，163.69，152.35 、 132.89 、 132.36 、 131.51 、 126.25 、 125.28 、 122.54 、116.00、P. Lv等人/工程6（2020）560565●●●●●●●●●●●115.85,108.59,和25.64;HR-Ms（ESI）M/z计算C20H13F05S（[M+H]+）：385.0546;实测值：385.0547。4-氯苯甲酸4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）甲基）苯基酯（9 e）。黄色固体;产率69.9%; m.p.188-189 ℃; 1H NMR （ 600 MHz ， CDCl 3 ） d ： 7.83 （ s ，1H ） ， 7.66 （ d ， J = 8.4 Hz ， 2 H ） ， 7.50 （ d ， J = 8.3Hz ，2 H），7.33（d，J = 8.3 Hz，2 H），和2.62 （s，3H）。13C NMR（150 MHz，CDCl3）d：197.60，187.13，163.86、152.25、140.53、132.41、131.60、131.55、131.51、129.07、127.42 、 126.23 、 122.53 、 108.59 和 25.73; HR-MS （ ESI ）m/zC20H13 ClO5S （ [M+H]+ ） 计 算 值 ： 401.0250; 实 测 值 ：401.0251。4-溴苯甲酸4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）甲基）苯基酯（9 f）。黄色固体;产率65.1%; m. p. 18413CNMR（150 MHz，CDCl3）d：197.60，187.14，164.03、152.23、132.41、132.08、131.70、131.54、129.27、127.88、126.25、122.52、108.60和25.73; HR-MS（ESI）m/z计算值：C20H13BrO5S（[M+H]+）：444.9745;实测值：444.9746。4-甲基苯甲酸4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5H）-亚基）甲基）苯基酯（9 g）。黄色固体;产率69.3%; m.p.181J= 15.2 ， 8.3Hz ， 4H ）和 2.62 （ s ， 3H ）和 2.46 （ s ， 3H ）。13CNMR （ 150 MHz ， CDCl3 ） d ： 197.58 ， 187.14 ， 164.72 ，152.65，144.85，132.36、131.75、131.25、130.28、129.38、126.24、126.01、122.65、108.62、25.71和21.78; HR-MS（ESI）m/z计算C21H16O5S（[M+H]+）：381.0797;实测值：381.0796。4-（三氟甲基）苯甲酸4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）甲基）苯基酯（9 h）。黄色固体;产率67.4%;m. p.1951HNMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.36（d，J= 8.6Hz，2H）和2.63 （ s ， 3H ）。 13C NMR （ 150 MHz ， CDCl3 ） d ： 197.53 ，187.12，163.51，152.07，132.40，131.74、131.38、130.63、126.48、125.70、122.44、108.59和25.63; HR-MS（ESI）m/z计算值C21H13F3O 5S（[M+H]+）：435.0514;实测值：435.517。●4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5H）-亚基）197.34、187.31、186.86、165.14、137.48、132.08、131.08、130.63、130.07、128.52、108.56、68.89、25.47和21.90; HR-MS（ESI）m/zC17H16O5S（[M+H]+）的计算值：333.0797;实测值：333.0800。4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5H）-亚基）甲基）苯甲酸丙酯（10 d）。黄色固体;产率70.6%; m.p.1421H NMR（ 400MHz，DMS0-d6 ）δ 7.83（s，lH ），7.65（d，J=8.3Hz，2H），4.30（t，J= 6.7Hz，2H），2.62（s，lH），2.63（s，lH），2.64（s，lH），2.65（s，lH）1H NMR （ 400MHz ， DMS0-d6 ） δ 1.8413CNMR （ 150 MHz ，CDCl3）d：197.34，187.34，186.84，165.72，137.60，131.67、131.01、130.68、130.10、128.62、108.57、66.91、25.46、22.06和10.48; HR-MS（ESI）m/z计算值C17H16O 5S（[M + H]+）。+H]+）：333.0797;实测值：333.0800。4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）-甲基）苯甲酸丁酯（10 e）。黄色固体;产率66.7%; m.p.1123H），1.793H）。13C NMR（150 MHz，CDCl3）d：197.34，187.33，186.84，165.72、137.58、131.66、131.01、130.69、130.10、128.60、108.55、65.23、30.70、25.47、19.25和13.74; HR-MS（ESI）m/z计算值：C18H18O5S（[M+H]+）计算值：347.0953;实测值：347.0954。4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）-甲基）苯甲酸辛酯（10 f）。黄色固体;产率65.4%; m.p.1131HNMR （400MHz，DMS0-d6）δ 1.8013C NMR（150 MHz，CDCl3）d：197.32，187.34，186.82，165.72，137.59，131.69，131.01，130.68，130.10、128.63、108.56、65.54、31.76、29.18、28.67、26.00、25.44、22.61和14.06; HR-MS（ESI）m/z计算值C22H26O 5S（[M + H]+）。+H]+）：403.0579;实测值：403.1580。4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5H）-亚基）甲基）苯甲酸苄酯（10 g）。黄色固体;产率69.8%; m.p.1681H NMR（ 400MHz，DMS0-d6 ）δ 7.82（s，lH ），7.64（d，J=8.3Hz，2H），7.45（d，J= 7.1H NMR（400MHz，DMS0-d6） δ 7.35（dd，J= 8.5，6.0Hz，lH），5.38（s，2H）和2.62（s，3H）。13CNMR（150 MHz，CDCl3）d：197.31，187.35，甲基）苯基 4- 甲氧基苯甲酸酯（ 9 i ）。黄色固体 ;产率 63.9%;m.p.155-156 ℃; 1H NMR（600 MHz，CDCl 3）d：8.14（d，1HNMR （ 400MHz ， DMS0-d6 ） δ 7.84 （ s ， lH ） ， 7.65 （ d ， J=8.2Hz，2H），7.33（d，J = 8.2Hz，1H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.99（d，J = 8.2Hz，2H），6.99（ d ， J= 8.3Hz ， 2H ） ， 3.90 （ s ， 3H ） 和 2.62 （ s ， 3H ） 。13CNMR（150 MHz，CDCl3）d：197.64，187.25，187.05，164.39、164.13、152.70、132.40、131.83、131.14、125.88、122.70、121.20 、 113.93 、 108.61 、 55.56 和 25.77; HR-MS （ ESI ）m/zC21H16 O6S（[M+H]+）计算值：397.0746;实测值：397.0747。4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）-甲基）苯甲酸甲酯（10a）。黄色固体;产率63.6%; m. p. 177 -178°C;1HNMR（600MHz，CDCl3）d：8.10（d，J=8.4Hz，2H），7.82（s，1H），7.82（s，1H），7.64 1H NMR（400MHz，DMS0-d6） δ：3.94（s，3H）和2.62（s，3H）。13CNMR（150 MHz，CDCl3）d：197.33，187.35，186.81，166.15，137.70，131.25 、 130.92 、 130.71 、 130.14 、 128.71 、 108.55 、 52.40 和25.46;HR-MS（ESI）m/z计算值C15H12O5S（[M+H]+）：305.0484;实测值：305.0486。4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5 H）-亚基）-甲基）苯甲酸乙酯（10 b）。黄色固体;产率64.5%; m.p.14713C NMR（150MHz，CDCl3）d：197.36、187.33、186.87、165.68、137.59、131.63、131.03、130.68、130.11、128.60、108.57、61.36、25.49和14.28; HR-MS（ESI）m/zC16H14O5S（[M+H]+）的计算值：319.0640;实测值：319.0640。4-（（4-乙酰基-3-羟基-5-氧代噻吩-2（5H）-亚基）甲基）苯甲酸异丙酯（10 c）。黄色固体;产率70.1%; m.p.1571H匪R（400MHz，DMS0-d6）δ 7·83（s，lH），7·63（d，J=8.2Hz，2H），5.293H）和1.37（d，J= 6.3Hz，6H）。13CNMR（150 MHz，CDCl3）d：566P. Lv等人/工程6（2020）560●●●●186.78、165.49、137.82、135.69、131.25、130.89、130.70、130.26、128.79、128.64、128.39、128.25、108.55、67.07和25.44; HR-MS(ESI)m/z计算值C21H16O5S（[M+H]+）：381.0797;实测值：381.0796。3-乙酰基-5-（2-溴亚苄基）-4-羟基噻吩-2（5 H）-酮（11 a）。黄色固体;产率66.9%; m.p.152-153℃;1HNMR（600MHz，CDCl3）d：8.14（s，1H），7.66（dd，J=11.3，8.5Hz，1H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.40（t，J= 7.5Hz，lH），7.2613C NMR（150 MHz，CDCl3）d：197.50，187.17，186.97，133.65，131.39、130.25、128.99、127.79、126.69、108.94和25.63; HR-MS（ESI）m/z计算值C13H9BrO3S（[M+H]+）：324.9534;实测值：324.9555。3-乙酰基-5-（3-溴亚苄基）-4-羟基噻吩-2（5 H）-酮（11b ） 。 黄 色 固 体 ; 产 率 69.7%; m.p.150-151 ℃; 1H NMR（ 600 MHz ， CDCl 3 ） d ： 7.72 （ d ， J = 7.2 Hz ， 2H），7.52（dd，J = 7.2 Hz1H NMR（400MHz，DMS0-d6）δ 7.33（t，J= 7.9Hz，lH）和2.62（s，3H）。13CNMR（150 MHz，CDCl3）d：197.32，187.25，186.74，135.66，133.64，133.26、130.56、129.14、127.85、123.20、108.55和25.45; HR-MS（ESI）m/z计算值C13H9BrO3S（[M+H]+）：324.9534;实测值：324.9555。3-乙酰基-5-（4-溴亚苄基）-4-羟基噻吩-2（5 H）-酮（11c）。黄色固体;产率78.6%; m.p.176-177 ℃; 1H NMR（600 MHz，CDCl 3）d：7.74（s，1H），7.59（d，J = 8.