美洲大蠊治疗湿热型溃疡性结肠炎的作用机制及疗效研究

医学信息学解锁26（2021）100746以美洲大蠊为君药治疗湿热型溃疡性结肠炎的理论依据吕昂a，陶磊 b，李启艳c， d，张静娜 b，唐淼 b，于万新 b，王玉佳 b，艾志琼a，*，赵宇b，d，刘恒b，e， **，吴秀梅a，b，*a中国云南大理大学公共卫生学院b云南省昆虫生物药物研发重点实验室，大理大学，云南大理c云南省第一人民d云南省2011年昆虫学协同创新中心，大理大学，云南大理，中国中国江苏省南京市南京中医药大学药学院A R T I C L EI N FO保留字：中药湿热型溃疡性结肠炎的多因素统计分析A B S T R A C T本研究旨在应用多元统计分析方法，定量、综合地探讨以美洲大蠊为君药的中药方剂对湿热型溃疡性结肠炎（UC）大鼠的治疗作用及其作用机制。采用高糖高脂饲料喂养SD雄性大鼠，建立湿热体质模型。用三硝基苯磺酸（TNBS）诱导湿热大鼠UC模型。美洲蒲公英（P）、蒲公英（T）、茯苓（F）因其活血养阴、生肌生肌的功效，被联合或单独作为中药制剂的成分用于缓解湿热体质和/或治疗UC。蒙古黄芪具有清热解毒、消肿利水的功效，茯苓具有清湿利水的功效。由于这些中药天然成分对湿热型UC表现出重叠作用，因此需要通过比较PT、PF、TF和PTF的作用来进一步说明作为君药的美洲商陆的治疗效果和作用机制。随机分为4组，每组10只动物，分别灌胃给药14 d，正常对照组和模型对照组分别灌胃生理盐水。定期或末次给药后第2天检测湿热指数、UC指数、血清及结肠黏膜生物标志物水平。典型相关分析和重复测量方差分析结果表明，含美洲大蠊和木霉的复方制剂的治疗效果显著。蒙古栎优于其它几种公式。对应分析结果提示，湿热型UC的疗效可能与湿热型UC的疗效有关通过减少白细胞介素-2（IL-2）的表达和增加转化生长因子-β（TGF-β）的水平来激活。多种多元统计方法的有机结合，可综合评价中医方剂对病因复杂的慢性病的疗效。1. 介绍溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）是一种慢性、非特异性的结肠和直肠炎性疾病，其病因和发病机制尚不完全清楚。它主要与结肠和直肠远端部分的粘膜接合[1传统的治疗方法治疗UC的方法包括氨基水杨酸制剂[4]、糖皮质激素[5]和硫嘌呤药物[6]。然而，这类药物只能控制症状，疗效不稳定，易复发，使用时有多种并发症[7]。它们的临床使用也是有限的，因为它们是昂贵的并且可能难以获得，并且因为容易使用，* 通讯作者。云南省昆虫生物药物研发重点实验室，大理学院，云南大理。** 通讯作者。云南省昆虫生物药物研发重点实验室，大理学院，云南大理。*** 通讯作者。电子邮件地址：www.example.comzhiqiong.ai @ 163.com（Z.-Q. Ai），lheng125@126.com（H. Liu），wX m6865@163.com（X.-M. Wu）.https://doi.org/10.1016/j.imu.2021.100746接收日期：2021年7月16日;接收日期：2021年9月23日;接受日期：2021年9月23日2021年9月24日网上发售2352-9148/©2021的 自行发表通过Elsevier 公司这是一个开放接入文章下的CCBY-NC-ND许可证（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）中找到。可在ScienceDirect上获得目录列表医学信息学期刊主页：www.elsevier.com/locate/imuA. Lu等人医学信息学解锁26（2021）1007462对它们的抵抗力。因此，需要替代疗法来有效控制UC的症状和并发症[8]。中药方剂在这方面具有一定的潜力。虽然UC在中医文献中没有记载，但其腹痛、便血、里急后重、便血等症状[7，9在《中西医结合诊治UC共识意见》中，UC辨证分型较多，湿热型UC在临床上较为常见湿热型溃疡性结肠炎是湿热入大肠，以排便次数增多，湿热内盛为以美洲大蠊为单味药的抗复X液主要成分，已生产并在市场上广泛流通[12]。其主要功能包括促进血液循环，滋阴，促进组织再生[13]。蒲公英是一种蔬菜，具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋的作用[13]。茯苓是一种食用菌，2. 材料和方法2.1. 化学品和试剂水合氯醛购自国药集团化学试剂有限公司，生理盐水购自贵州天地制药有限公司，从泸州老窖有限公司购买老白干，油脂购自佛山市顺德区三海食品贸易有限公司，大瑶野坝子蜂蜜购自天澳惠源蜂食品有限公司，弗氏完全佐剂和三硝基苯磺酸（TNBS）购自美国Sigma公司。隐血试剂盒购自南京建成生物技术研究所。IL-6、IL-8、TNF-α、CRP、TGF-β、MPO、IL-2和IL-17 ELISA试剂盒购自上海ELISA技术有限公司，公司2.2. 药物配方(1) 的 PF 式 是 米X埃德 百分之三十五 W/W 的 水 提取物清利水[13]。这些成分通过减少炎症介质的表达，减轻结肠炎的严重程度，保护和修复粘膜组织，被广泛用于治疗UC相关综合征，尤其是湿热症状[14因此，结合这三种天然药物设计一种新的配方来改善湿热型UC的临床症状是值得的虽然湿热型UC的发病机制尚不清楚，但可能 与促炎因子和抗炎因子失衡有关[19]，导致肠黏膜屏障无法维持稳态，最终导致黏膜组织受损，发生湿热型UC。 白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-2（IL-2）和白细胞介素-17（IL-17）都是促炎因子，参与细胞免疫反应，而转化生长因子-β（TGF-β）是抗炎因子，具有免疫调节和组织修复等生物活性。肠组织髓过氧化物这些生物标志物在理论上在炎症反应和免疫调节中发挥重要作用[2，20-22 ]，但大多数生物标志物无法识别与传统药物作用机制直接相关的生物标志物。因此，可能与P. 美国，T.蒙古黄芪、茯苓在湿热型溃疡性结肠炎中的应用进行了验证。与临床常用药物不同，中药方剂中含有多种成分，成分结构较为复杂，难以客观评价疗效，也难以探讨其作用机制。此外，上述物质的报告效应尚未得到全面和结论性的研究，其数据分析方法通常是单变量的，具有简化的视角[23因此，基本的统计分析无法对这些配方的效果和作用机制提供充分的评估。此外，由于大鼠湿热UC相关数据的复杂性和高度相关性，值得探索多元统计分析原理和技术的适用性。因此，本文应用多元统计分析方法，对三种中药物质治疗湿热型UC的疗效评价及作用机制进行了探讨。P. americana和 百分之六十五 W/W 粉末 干 真菌 菌核P. 可可。(2) PT配方由混合的60%w/w美洲虎的水提取物和40%w/w的T. 蒙古草(3) TF配方由混合物X 55%w/w的T. mongolicum和45%w/w的P. 可可。(4) PTF配方混合32%w/w的水提取物，P. americana，40%w/w的粉末T. mongolicum和28%w/w的P. 可可。2.3. 实验动物与湿热型UC造模50只雄性Sprague Dawley（SD）大鼠（180LTD.动物实验方案获得伦理批准（许可编号：2018-0627，年份：2018）。随机选取SD大鼠40只作为对照组，正常饮食喂养，其余大鼠在正常饮食基础上加喂高糖高脂饮食，造成湿热体质，用异基因抗原和TNBS诱导如果大鼠表现出以下至少3种体征：皮毛蓬松、蜷缩姿势、不活动和/或食欲不振、肛门发红或潮湿、大便稀软或稀便、尿色暗黄，则将湿热证评价为成功造模[26]。湿热型UC造模及药膳喂养时机安排如下：1) 第0天：基线数据收集;2) 第1~ 18天：高糖高脂饮食致湿热证，对照组喂普通饲料;3) 第19 ~ 23天：TNBS诱导UC，假手术组控制;4) 第24 ~ 37天：中药配方喂养;5) 第40天：观察结束。2.4. 实验分组造模后观察5天，共30只中度炎症模型大鼠纳入随访实验。疾病活动指数（DAI）评分范围为7 - 9，被视为中度炎症[27]。随机分为模型对照组、PF组、PT组、TF组、PTF组，每组6另取同批健康大鼠6只作为正常对照。正常组和模型组给予生理盐水灌胃其余4组均给予药物灌胃配方（洗胃，566 mg/kg，分别标记为PF、PT、TF和PTF配方）。A. Lu等人医学信息学解锁26（2021）1007463±2.5. 疾病指标2.5.1. 湿热指数在第0、21、27、33和40天，记录每只大鼠12 h内的粪便计数、尿量和肛温。2.5.2. UC指数于湿热第0、21、23、27、30、33、36、40天进行疾病活动指数（DAI）评分。DAI包括体重测量、粪便稠度评价和通过潜血试剂盒检测粪便中是否存在血液，并根据表1进行分级。处死大鼠，快速剥离所有大鼠结肠并测量其自然伸展长度。切除结肠后，用无菌盐水冲洗肠内容物。将水用无菌吸墨纸干燥，并测量结肠的湿重。结肠黏膜损伤指数（CMDI）分级表2CMDI评分标准。评分CMDI评分标准0没有损坏1轻度充血水肿，表面光滑，无糜烂或溃疡2充血水肿、粘膜粗糙、颗粒状、糜烂或肠粘连3表面高度充血水肿、坏死破溃，面积1cm2，肠壁增厚或坏死，炎性息肉<表面4重度充血性水肿，粘膜坏死和溃疡，≥1cm2或整个肠壁坏死，至Xic巨结肠导致死亡表3组织学评分。上皮细胞炎症细胞浸润评分0正常无浸润1杯状细胞丢失浸润至隐窝表2[28]。在对结肠进行宏观评估后，将其固定在10%的2大面积杯状细胞丢失侵入粘膜肌层缓冲 甲醛， 嵌入式 在 石蜡， 分段，和苏木精-伊红染色。结肠组织切片，3隐窝细胞丢失浸润深入肌层粘膜，伴有粘膜在显微镜下分析并拍照保存。的4EX紧张性丧失还有明显的水肿根据表3[29]对组织病理学评分（HS）进行分级。2.5.3. 结肠组织和血清中生物标志物水平的测量严格按照ELISA试剂盒的操作说明，检测大鼠血清和结肠组织中IL-6、IL-8、TNF-α、CRP、TGF-β、MPO、IL-2、IL-172.6. 统计分析所有统计学分析均采用SPSS25.0软件进行。显著性水平设定为0.05。数据表示为平均值的平均标准差。2.6.1. 典型相关分析采用CCA评估一组湿热变量（粪便计数、尿量和直肠温度）与另一组UC疗效变量（DAI评分、CMDI评分和HS评分）之间的关系。2.6.2. 方差分析（ANOVA）重复测量ANOVA模型用于评估从炎症到治疗结束的DAI评分变化。采用单因素方差分析法（One-Way ANOVA）观察8种生物标志物对不同配方大鼠血清和结肠组织的影响。多重比较浸润到达粘膜下层隐窝细胞2.7. 作用机制的计算机模拟研究应用AutoDock Tools 1.5.6对药物的主要成分和多重对应分析结果提示的潜在生物标志物进行对接分析，验证药物对湿热型UC的作用机制。3. 结果3.1. 不同中药组方对湿热型溃疡性结肠炎大鼠在研究的第40天，测量粪便计数、尿量和肛温的湿热指数以及DAI、CMDI和HS评分的UC指数如表4所示，通过单因素方差分析评估不同配方对湿热UC的影响。与正常组比较，模型组大鼠的DAI、CMDI、HS评分均显著升高。PT和PTF组显示DAI评分降低CMDI和HS评分为表4对湿热型UC大鼠湿热指数和疗效指数的影响=36）。使用最小显著差异（LSD）检验。组粪便计数尿量直肠温度戴评分CMDI评分HS评分2.6.3. 多重对应分析采用多元对应分析方法，探讨喂养组（PF、PT、TF和PTF组）与生物标志物（IL-6、IL-8、TNF-α、CRP、TGF-β、IL-2、IL-17和MPO）的关系。正常组模型组10.33±1.9712.83±2.239.37±1.9419.33±2.71*36.80±0.5837.35±0.570.67±0.526.50±1.38*0.67±0.523.33±0.52*0.50±0.557.17±0.75*采用最优尺度分析法分析了be-PF之间的12.3318.9437.38±6.17±1.67±△3.83±△DAI评分和八种生物标志物之间的关系。表1PT组组±3.5612.50±2.592.63*14.49±4.22*0.8136.50±0.49△1.47*3.17±1.33*0.82*2.33±0.52*1.17*4.67±1.21*DAI评分系统。TF11.0017.2237.60±6.17±2.33±△5.83±△评分体重减轻（%）大便粘稠度便血00正常正常1≥1至5半松散（+）粪便伴潜血（+）组PTF组±2.4511.33±2.582019-06 - 21±5.19*0.30*36.67±0.23△0.75*3.00±1.26*0.52*1.50±0.55*0.98*2.83±0.75*2≥5-10半松散（++）粪便伴潜血（++）3≥10-15松散（+）血便（+）4≥15松散（++）血便（++）* 与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.05）;△与模型组比较，差异有统计学意义（P0. 05）。<△△△△△△△△A. Lu等人医学信息学解锁26（2021）1007464-==在所有四个给药组中均降低。此外，如图1所示，模型组固有层受损，上皮细胞丢失，炎性细胞强烈浸润，肠腺大面积坏死，出血水肿，中性粒细胞严重浸润并穿透至肌层。与模型组相比，PF、PT、TF、PTF组大鼠结肠黏膜病理改变均有不同程度的减轻，杯状细胞部分修复，炎性细胞浸润面积减少。3.2. 湿热型溃疡性结肠炎大鼠DAI评分与疗效的关系结果表明，湿热指标与UC指数（F=4.757，P0.001）。<第一典型相关系数为0.799，表明第一典型变量集（U1，V1）具有较高的正相关性，提示湿热指标与UC指标具有一定的相互表征能力。此外，标准化典型相关系数为0.850，表明DAI评分与UC指数具有较强的相关性，因此DAI与湿热指数也具有较强的相关性（表5，图5）。 2）的情况。3.3. 湿热型UC大鼠治疗后DAI评分的比较如表6所示，实验第23天，正常组DAI评分明显低于其他各组（P<0.01），这意味着建模是成功的。 此外，DAI模型组与灌胃组之间的评分具有可比性和均匀性（P>0.05）。停药后第37天，PT组和PTF组DAI评分均显著低于模型组（P0.01）。<此外，每个时间点的DAI评分差异具有统计学显著性（F212.728，P0.001）。<此外，观察到不同时间点和分组之间的相互作用（F 10.675，P<图3显示在第40天，PTF和PT组的DAI评分表5UC大鼠湿热指标与疗效指标间第一对典型变量的典型结构。RcU1ScV1ScF P0.799粪便计数-0.411 DAI-0.850 4.7570.001尿量-0.785 CMDI-0.466直肠温度-0.330 HS 0.165U1：湿热指标，包括大便量、尿量和直肠温度;V1：疗效指标，包括DAI评分、CMDI评分和HS评分; Rc：第一典型相关系数; Sc：标准化相关系数。与模型组比较，PTF组和PT方组均有显著性差异，说明PTF和PT方具有明显的治疗作用。3.4. 饲养组别与生物标志物如表7和表8所示，各喂养组IL-17与模型组相比无明显差异，推测IL-17与UC无直接关系。同时，多重对应分析表明PF组（No. 1-此外，与模型组相比，这两组中的TGF-β显示出显著差异（表8），表明美洲黑杨和椰壳黑杨支持肠粘膜的修复此外，PT组（编号7-12）的MPO与TF组（编号13-16）相似。它们在代表CRP、TNF-α、IL-8、IL-6、IL-2等一系列炎症指标的点上基本吻合，说明PT和TF方的疗效对这些炎症介质有影响（图4）。但如表7和表8所示，TF组中仅CRP和TNF- α的表达显著低于模型组，表明TF组是T.结论：复方中黄芪具有抗炎作用，能有效降低炎症因子的表达。表9显示了IL-6、IL-8、CRP、IL-10和IL-12的负载的绝对值Fig. 1. 大鼠结肠组织病理切片。大鼠结肠直肠的代表性组织病理学图像。模型组大鼠胃黏膜杯状细胞和隐窝缺失，炎细胞浸润严重。A. Lu等人医学信息学解锁26（2021）1007465△图二、 第一对典型变量的典型结构示意图。表6湿热型溃疡性结肠炎大鼠给予不同方剂后DAI评分表8给予不同配方的大鼠结肠组织中的生物标志物组DAI评分23天37天40天正常组0.50± 0.55 1.33± 0.82 0.83±0.75 0.67 ± 0.52模型组0.67± 0.52 9.12± 0.75* 6.67±1.63* 6.50 ± 1.38*PF组0.67± 0.52 9.33± 0.52* 6.17±1.47* 6.17 ± 1.47*PT组0.67± 0.52 8.50± 1.38* 3.00± 0.89*△3.17± 1.33*△TF组0.67± 0.52 8.50± 1.52* 6.00±0.89* 6.17 ± 0.75*TGF-β组（pg/ mL）IL-2（ng/mL）MPO（ng/mL）IL-17（pg/mL）PTF组0.50± 0.55 9.50± 1.38* 3.50± 0.55△3.00± 1.26*△* 与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.01）;△与模型组比较，差异有统计学意义（P0.01）。<16.84*△TF组62.63±12.45美元 *PTF组255.78±9.32*△0.097*△2.52±0.322*1.07±0.251*39.17美元 *236.30 ±17.00*△206.62 ±10.71*△168.41±130.39*55.56 ± 9.49图3.第三章。 不同组别治疗UC的疗效随时间的变化趋势。表7给予不同配方的大鼠血清中的生物标志物组IL-6（pg/mL）IL-8（pg/mL）CRP（ng/mL）TNF-α（pg/mL）毫升）* 与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.01）;△与模型组比较，差异有统计学意义（P0.01）。<正常组20.39± 6.89 99.57±16.621407.32±77.29121.42 ±12.51模型组194.73 ±10.29*417.72±13.08*5537.91±70.19*588.85 ±9.93*PF组90.33±△218.15±3248.47±327.47 ±图四、给药途径的对应分析结果12.53美元 *PT组186.31±13.12*TF组182.59±9.63*PTF组73.33±9.82*△22.28*△409.31±7.41*400.06±10.89美元 *188.67±27.61*△31.25*△5162.65±198.64美元 *4879.41±54.52*△2500.73±171.53*△19.57*△515.74 ±18.23*493.36 ±23.55*△280.67 ±31.10*△组和生物标记。TNF-α、TGF-β和IL-2在维度1上均为1左右，在维度2上均为髓过氧化物酶和IL-17既不在1维，也不在2维，意味着这两个因素与其他六个因素处于不同的平面上，* 与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.01）;△与模型组比较，差异有统计学意义（P0.01）。<因素△正常组329.30 ±16.330.32 ±0.142141.61 ±18.6233.27 ±2.48模型组46.29±10.70美元 *2.77±0.178*435.50 ±9.89*92.53 ±3.77PF组236.48 ±16.18*△1.43±0.078*△268.13 ±12.97*△47.37 ±2.87PT组164.37 ±1.88±443.31 ±67.28 ±4.59A. Lu等人医学信息学解锁26（2021）1007466--表9不同维度的所有生物标记物的组分负载生物标志物1 2IL-6-0.999 0.028IL-8-0.998 0.028CRP-0.999 0.031TNF-α-0.999 0.028TGF-β0.999-0.031IL-2-0.999 0.030MPO-0.200 0.971IL-17-0.860-0.4333.5. DAI评分与8项生物标志物的关系图5显示，DAI评分对IL-2、IL-17和TGF-β的投影可以明显分为两部分，这意味着只有这三个因素与DAI评分高度相关。此外，如图6所示，灌服中药方剂14天后，PF组和PTF组TGF-β的表达最接近正常组，IL-2水平较模型组下降更明显。3.6. 对接分析基于上述结果，对TGF-β 1进行对接分析β和L-色氨酸，一的的主要化学的组件P. 美国， 和 IL-2 和 咖啡 酸， 的 首席 chemical ofT.蒙古草如图7所示，TGF-β的5 TX 4蛋白与L-色氨酸之间形成一个氢键，它们之间的键能为5.81。IL-2的5LQB蛋白与咖啡酸之间形成5个氢键，键能为-5.44（图8）。4. 讨论溃疡性结肠炎是一种难以管理的复杂疾病，由于其多种病因和缺乏特定的治疗药物[30]。此外，现有的临床药物具有显著的副作用[31，32]，这导致患者的依从性低。针对上述局限性，运用中医理论和方剂治疗湿热型UC是有效的。采用TNBS诱导的UC模型来模拟人UC的急性期，并评价中药的疗效[33]。如表4所示，正常组和其他组之间的DAI评分存在显著差异，这意味着建模是合理的。此外，DAI、CMDI和HS评分在以下方面有效：图五、 八个 生物标记物上DAI分数的投影质心。图六、各组IL-2、TGF-β的表达。证明了中药方剂对湿热型UC大鼠的疗效。然而，单因素方差分析的结果显示，上述评分未能获得总体结果。因此，基本的统计分析不能全面评价和明确阐述中药方剂的疗效。多元统计分析在中医复杂问题的研究中得到了认可，并对我们的实验设计和评价产生了重要影响[34将多种多元统计技术有机结合起来，探讨不同中药对湿热型UC的疗效及其作用机制采用CCA方法反映湿热型UC的湿热指标与UC指标之间的内在联系。结果表明，通过CCA，DAI评分与UC指数的相关性最强（标准化典型相关系数为0.850）。此外，与CMDI和HS评分不同，CMDI和HS评分是从处死动物中获得的，无法动态监测，DAI评分是使用非侵入性程序测量的，我们可以观察大鼠的整个实验过程。DAI评分包括大鼠体重、大便性状、隐血等指标，能全面反映UC湿热指标。DAI评分可作为湿热型UC疗效评价的综合指标。在此基础上，对DAI评分进行纵向数据分析，建立统计模型，动态观察不同中药组的疗效。 的结果重复测量方差分析表明，PT和PTF的作用开始于喂药后4 -9天（第26 ~31天），PTF在停药后仍有效（第37天 至第40天），表明与模型组相比，延长给药时间，除正常组外，其余各组DAI评分均呈下降趋势。在控制时间效应的情况下，PTF和PT对UC的防治效果均优于其他饲喂组。根据上述结果，设计了以美洲商陆、白木香为主要成分的中药复方。结果表明，黄芪、黄芪多因素相关性分析表明，美洲商陆和椰壳商陆对湿热型UC大鼠肠黏膜的修复有一定的促进作用，对湿热型UC大鼠的临床症状有一定的缓解作用。这一发现验证了美洲原球茎对UC粘膜修复作用的相关研究工作[37，38]，同时也是首次报道椰壳原球茎具有此作用。图4说明PT和TF配方的疗效对炎症介质有影响。但如表7和表8所示，TF组中仅CRP和TNF- α的表达显著低于模型组，表明T.蒙古黄芪具有抗炎作用，能有效地降低A. Lu等人医学信息学解锁26（2021）1007467图7.第一次会议。TGF-β和L-色氨酸的5 TX 4蛋白的对接分析。图8.第八条。IL-2和咖啡酸的5LQB蛋白的对接分析。炎症因子的表达。这与Han及其团队报告的发现一致[39]。因此，可以得出结论，当美洲大蠊和T.结果表明，中药复方中含有黄芪、黄芪这与PTF和PT方对湿热型UC大鼠的疗效优于其他方的结论一致。通过调节MPO、IL-1β、TNF-α和IL-6的表达，可以减轻湿热型UC的症状[37，38]。本文采用多元对应分析方法验证了四种中药方剂与八种生物标志物之间的相关性结果显示，PF和PTF组在同一象限，接近TGF-β; PT接近MPO; TF接近CRP、TNF-α、IL-8、IL-6和IL-2（图5）。基于此，结合表9所示的结果，我们发现MPO和IL-17与TGF-β、CRP、TNF-α、IL-8、IL-6和IL-2不在同一平面提示MPO和IL-17不能作为中药作用机制的有效因子。在以DAI评分作为评价湿热型UC大鼠疗效的综合指标的基础上，对DAI评分与8项生物指标进行最优尺度分析。图5显示，DAI评分对IL-2、IL-17和TGF-β的投影可以明显分为两部分，这意味着只有这三个因素与DAI评分高度相关然而，IL-17在先前的讨论中被移除。因此，IL-2和TGF-β最终被保留作为反映这些物质作用机制的指标此外，如图6所示，中药方剂灌胃14天后，PF和PTF的TGF-β表达最接近正常组，IL-2水平较模型组下降更明显，表明两组通过降低IL-2水平和升高TGF-β浓度来缓解UC大鼠湿热症状相关研究工作表明，P. americana与MPO、IL-1 β、TNF-α和IL-6相关[37，38]，T. 与IL-1 β、TNF-α和IL-6相关[39]。但是，上述研究均未提及哪些因素相对重要，因此我们尝试提出美洲大蠊和美洲大蠊是两个重要的影响因子。首次应用综合多元统计分析方法，探讨了蒙药治疗湿热型UC的作用机制，即通过调节IL-2和TGF- β的表达来达到治疗湿热型UC的目的。此外，为了证实上述理论结果，对接分析被用来评估化学品之间的相互作用，P.americana和T.蒙古黄芪及其治疗湿热型UC的生物标志物。美洲商陆主要化学成分为蛋白质、多肽、氨基酸、核苷等，对腹胀腹泻、粘膜损伤等有治疗作用[13]。而T.蒙古黄芪为黄酮类和三萜类化合物，具有清热解毒、消肿利尿的作用[13]。L-色氨酸是美洲大蠊的主要成分之一，与组织修复功效有关。而T.蒙古黄芪的抗炎作用与其抗炎作用有关。因此，对接分析的结果表明，美洲大蠊和T.结论：蒙药可通过调节TGF- β和IL-2的生物学活性来缓解湿热型UC的症状。在研究过程中出现了一些意想不到的结果，统计分析在图3中，可以观察到两个离群值（No.17和No.18）。我们对这两点进行了一定程度的处理，在去除了可疑的“强影响点”17号和18号后，我们对剩余的34名受试者重复了统计分析，发现分析结果证实了考虑所有36名由于样本数量较少，如果再次删除这两个研究受试者，检验（1-β）的把握度可能不足，这可能会影响统计分析的结果。因此，其余分析仍包括所有36例受试者。以上结果支持了本分析中使用的多个多元统计分析模型的组合能够评价中医方剂对致病因素复杂的慢性病的疗效。以美洲商陆、木霉为主要成分的中药配方。结论：蒙药具有治疗湿热型UC的潜力。提示这些物质主要通过降低IL-2的表达，提高TGF-β的水平发挥其治疗作用。资金支持本 研 究 得 到 了 以 下 基 金 的 资 助 ： 国 家 自 然 科 学 基 金（NO.81660186，81660605，81860742，81860765）;云南省基础研究项目（NO.2018FB143，2019 FH 001 -003，202001 AT 070021）;云南 省 创 新 团 队 （ NO.2018FB143 ， 2019 FH 001 -003 ， 202001 AT070021 ） ; 云 南 省 自 然 科 学 基 金 （ NO.81660186 ， 81660605 ，81860742，81860765）。大理昆虫生物制药学院A. Lu等人医学信息学解锁26（2021）1007468该项目获得云南省工业和信息化厅中药饮片专项基金、大理学院药用昆虫和蛛形纲动物资源数字化开发创新团队、云南省工业和信息化厅中药饮片专项基金、云南省中医药大学中药饮片研究院中药饮片2019-YG-067）。竞合利益作者声明，他们没有已知的可能影响本文所报告工作致谢作者感谢Yun Pan教授对探索组织样本和病理学的指导，以及大理大学的Guangming Liu教授、Chenggui Zhang博士、Yinhe Yang博士和HuaiXiao博士对完善手稿的意见和建议。此外，我们还要感谢大理大学的国际专家Manoj Kumar Vashith博士，他是一位母语为英语的人，他对我们的修订稿进行了校对。引用[1] 李学磊，王万伟，林朗，柯岩. 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