单细胞seurat流程中,怎么提取某种基因在各个群中的表达矩阵
时间: 2024-03-23 18:39:06 浏览: 596
单细胞测序工作流程 :关键步骤和注意事项 .pdf
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在Seurat中,可以使用函数`FindMarkers()`来寻找不同群组之间具有显著差异表达的基因。该函数会返回每个群组中每个基因的平均表达量和表达差异的p值等信息。你可以使用该函数来获取某个基因在不同群组中的表达矩阵。
具体步骤如下:
1. 从Seurat对象中提取每个群组的细胞簇ID,可以使用`Idents()`函数获取。
2. 对于每个群组,使用`FindMarkers()`函数查找具有显著差异表达的基因。在函数调用中,设置参数`test.use = 'roc'`来使用ROC曲线分析结果,设置参数`only.pos = TRUE`来仅寻找表达上调的基因。
3. 对于每个基因,将其在不同群组中的表达水平提取出来,可以使用`DoHeatmap()`函数来进行可视化,或者使用`FetchData()`函数从Seurat对象的`@markers`属性中提取数据。
举个例子,假设你想获取基因"CD8A"在Seurat对象"pbmc"的不同群组中的表达矩阵,代码如下:
```
# 从Seurat对象中提取每个群组ID
idents <- Idents(pbmc)
groups <- levels(idents)
# 查找具有显著差异表达的基因
markers <- lapply(groups, function(group) {
FindMarkers(pbmc, ident.1 = group, test.use = 'roc', only.pos = TRUE)
})
# 提取基因"CD8A"在各个群组中的表达数据
cd8a_data <- lapply(markers, function(markers) {
cd8a_marker <- markers[markers$gene == 'CD8A', ]
cd8a_expr <- FetchData(pbmc@markers, vars = cd8a_marker$gene)
cd8a_expr
})
# 将表达数据合并成矩阵
cd8a_matrix <- do.call(cbind, cd8a_data)
colnames(cd8a_matrix) <- groups
```
这样,你就可以得到基因"CD8A"在不同群组中的表达矩阵`cd8a_matrix`了。
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