UV-B胁迫下紫花苜蓿qRT-PCR稳定内参基因筛选及其应用

0 下载量 6 浏览量 更新于2024-09-08 收藏 380KB PDF 举报
本研究聚焦于UV-B辐射对紫花苜蓿(Medicago sativa)基因表达的影响,特别是在qRT-PCR分析中的内参基因选择。qRT-PCR是一种分子生物学技术,用于定量检测特定基因在细胞或组织中的转录水平。在植物生理学和基因表达研究中,内参基因的选择至关重要,因为它们用于校正因实验条件变化导致的非特异性差异,确保结果的可靠性和准确性。 研究团队,由张薇、崔为体、赖迪文、汪瑾、沈文飚和谢彦杰等人组成,利用南京农业大学的生命科学学院和实验中心资源,针对紫花苜蓿幼苗的根、茎和叶组织进行了实验。他们主要考察了Actin2、GAPDH、MSC27、18sRNA、b-tubulin、bZIP、UBQ、PPPrep、Ms03_50f03和Ms03_69f07等潜在的内参基因在UV-B辐射下的表达稳定性。这些基因常被用作基因表达分析中的标准,因为它们在不同组织和条件下通常表现出相对恒定的表达水平。 研究结果显示,在UV-B胁迫下,紫花苜蓿幼苗根部的MSC27和UBQ基因表达比较稳定,而茎部更适合使用MSC27和Actin2作为内参基因。对于叶片的研究,Actin2和GAPDH的组合提供了更为精确的基因表达数据。这说明在处理紫外线辐射这样的环境压力下,准确选择内参基因有助于提高对紫花苜蓿关键基因响应的定量分析的精度。 该研究不仅验证了内参基因在处理环境胁迫下的适用性,还为UV-B胁迫下紫花苜蓿基因表达调控的研究提供了实用工具。其研究成果发表在《中国科技论文在线》,并得到了高等学校博士学科点专项科研基金、南京农业大学青年科技创新基金以及国家自然科学基金的支持。通讯作者谢彦杰教授的邮箱为yjxie@njau.edu.cn,有兴趣的读者可以通过此渠道获取更多相关信息或进一步讨论。 这项工作的关键词包括紫花苜蓿、实时荧光定量PCR、内参基因、geNorm和NormFinder,这些都是生物科学领域内的关键术语,反映了研究的热点和方法。通过这些关键词,读者可以快速定位到相关领域的文献和研究进展。该研究对于理解和应对环境胁迫下植物基因表达调控具有重要的理论和实际意义。