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第
28
卷第
5
期
2014
年
10
月
高才主千
ι
学 工
4
呈学才
民
Joumal
ofChemical
Engineer
ing
ofChinese
Universities
NO.5
Vo
l.
28
Oc
t.
2014
文章编号
1003-9015(2014)05-1051-08
网络出版地划
http:
仇
WWW.
口1k
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cm
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0
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003-90
15
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14.05
.
14.05.html
C-G-Ha-HS
支架改性协同原儿茶酸对
NS/PCs
粘附及定向分化的影响
张晓庆,关水
,
葛升,王树萍,刘天庆
,
马学虎
(大连理工大学干细胞组织工程实验室
,
辽宁大连
116024)
摘
要:
通过层粘连蛋
白
(LN)
对壳聚糖
-
明胶
-
透明质酸
-
硫酸肝素
(C-G-Ha-HS)
复合支架进行修饰
,
提高支架粘附率
,
优
化神经干/
祖细胞
(NS
/
PC
s
)
三维培养体系
,
同时考察了原儿茶酸
(PCA)
对三维条件下
NS
/
PCs
分化为多巴胶
(DA)
能神经元
的影响。扫描电锐观察及
CCK
-
8
分析表明
,
C-G-Ha-HS
复合支架孔径为
90
-
130μm
,
孔隙内的
NS
/
PCs
伸
出
类似神经
样的突触使支架与细胞相互连接形
成
网状结构
:
培养
4h
后, LN
修饰的
C-G-Ha-
HS
(5:5)
支架细胞中占附率增加至
未
修饰
组的
(
113.53
土
4.32)%:
培养
96
h
后
,
细胞活率增加至未修
tín
组的
(1
20.30
士
6.65)%:
免疫细胞
化
学鉴定表明,
1%
胎牛
血
i
占
(FBS)
和
0.06
mmol.
L-
l
PCA
协同作用
,
明显提高了
NSIPCs
向
DA
能神经元分
化
率
,
T
H
阳性细胞分
化
率达到
I
J
(l
6.53
士
0.65)%
,增加至空支架组的
(1
72.
72
士
6.79)%:
Nurr
l
阳性细胞分化率达到
(
15
.93
士
0.91)%
,增加至空支架组的
(
1
8
1.
23
士
1.04)
%:
研究结果为
PCA
应用于
NS
/
PC
s
移植治疗
PD
提供了实验依据。
关键词:
壳聚糖
-
明胶-透明质酸
-
硫酸肝素支架
:
层粘连蛋
白,
神经干/祖细胞
,
原儿茶酸
,
分
化
中图分类号
Q
813.
1
文献标识码
A
DOI
,
10.3969
/
j.issn.1003-9015.2014.05.14.05
The
Synergistic Effect
of
Modified Chitosan-Gelatin-Hyaluronate-Heparan Sulfate
Scaffolds
and
PCA
on NSIPCs Adhesion
and
Di
fferentiation
ZHANG
Xiao-qing
,
GUAN
Shui
,
GE
dan
,
矶
r
ANG
Shu-ping
,
LIU
Tian-qing
,
MA
Xue-hu
(Stem
Cell
and
Tissue
Engineering
Laboratory
,
Dalian
University
ofTechnology
,
Dalian
116024,
China)
Abstract:
Chitosan-gelatin-hyaluronate-heparan
sulfate
(C-G-Ha-HS)
scaffolds
were
fabricated
and
modified
with
laminin
(LN)
in
order
to
improv
e
scaffo
ld
adhesion
and
optimize
3-D
culture
system
of
neural
ste
m/
progenitor
cells
(N
S/PCs).
The
effects
of
protocatechuic
acid
(PCA)
on
the
inducing
of
NS
/PCs
differ
entiation
into
dopaminergic
neuron
were
determined
at
3-D
level.
SEM
and
CCK-8
assay
results
s
how
that
the
pore
size
of
the
C-G-Ha-HS
scaffolds
is
90
-
130μm
and
the
NS
/PCs are
connected
with
the
scaffolds
to
form
reticular
structure.
Compared
with
LN-unmodified
C-G-Ha-HS(5:5)
scaffolds
,
LN-modified
scaffolds
enhance
the
NS
/PCs
adhesion
rate
by
(113.53
土
4.32)%
a
丘
er
4
hours
and
increase
cell
viability
by
(1
20
.
30
土
6.65)%
after
96
hour
s.
Im
munocytochemistry
assay
shows
that
the
synergistic
effect
of
1 %
Fetal
Bovine
Serum
(FBS)
and
0.
06
mmol. L - 1
PCA
can
enhance
the
differentiation
rate
of
NS
/PCs into
neurons.
The
differentiation
rate
of
TH
an
d
Nurrl
positive
cell
can
reach
up to
(1
6.53
土
0
.
65)%
and
(1
5.93
土
0
.
91
)%, r
es
p
ective
ly.
Compared
with
the
control
scaffold
group
,
the
differentiation
rate
ofTH
and
Nurrl
positive
cell
are
enhanced
by
(172.
72
土
6.79)%
and
(1
8
1.2
3
土1.
04)%.
These
results
provide
experime
ntal
data
for
the
application
ofPCA
in
the
treatment
of
PD
by
NS
/PCs
transplantation.
Key
words:
chitosan-gelatin-hyaluronate-heparan
sulfate
scaffold;
laminin;
neural
stem
/
progenitor
cells;
protocatechuic
acid;
differentiation
收稿日期
2
013-03-20
‘修订日期
2
013-06-21
0
网
络出版时间
2014-05-14
1630
,57
基盘项目
国东自然科学基金
(
3
0
8
002
8
8)
巾央高校基本科研业如费专琐资金资助项目
(DUTI2JBO
呵
。
作者简介·
张晓庆
(19
88
-)
,
女,辽宁锦州人,大连
理工 大学硕
士生.
通讯联系人
关水
,
E-mail:
g
uan
s
hui
@d
lu
l.
e
du.cn