保加利亚乳杆菌β-Hexcase基因克隆：简并引物法与应用

本文档主要探讨了一项在2013年的研究，标题为"简并引物法克隆保加利亚乳杆菌β-N-乙酰氨基己糖苷酶基因"。这项研究关注的是β-N-乙酰氨基己糖苷酶（β-Hexcase），这是一种在细菌、植物和动物中普遍存在的重要酶，它具备外切酶活性，能够催化去除β-N-乙酰氨基己糖的非还原性氨基己糖残基，对于细菌细胞分裂过程具有关键作用。研究人员选择了一种与保加利亚乳杆菌LJJ有相近亲缘关系的菌种，目的是克隆这种酶的基因片段。 研究团队利用在线的简并引物设计工具，如ICODEHOP和CODEHOP，设计了一对简并引物，即Hex1-f和Hex1-r，作为PCR扩增的引物。他们使用LJJ菌株的基因组DNA作为模板，通过PCR技术成功扩增出了一段614bp的产物。这个PCR产物随后被连接到pGEM-T质粒载体上，并成功克隆到了大肠杆菌DH5α中，这一过程属于基因工程中的常规操作，是基因克隆和表达的基础步骤。 这项研究的意义在于，通过对β-Hexcase基因的克隆，有助于理解其在保加利亚乳杆菌中的生物学功能，以及可能在食品工业中的应用，例如在乳制品生产中的细胞自溶调控作用。此外，它也为我国乳酸菌资源的开发利用提供了理论支持，特别是对于传统发酵乳制品的品质控制和安全检测技术的研究。 该论文发表在《食品科学技术学报》上，作者包括崔文明、刘摇鹭、张书文等人，他们来自中国农业科学院农产品加工研究所，强调了这项工作的科学价值和实际应用前景。文章的引用格式为：CUI Wen-ming, et al., Cloning of β-N-Acetylhexosaminidase Gene Fragment from Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LJJ with Degenerate Oligonucleotide Primers. Journal of Food Science and Technology, 2013, 31(1): 33-37。 这篇论文揭示了通过简并引物技术在保加利亚乳杆菌中克隆特定酶基因的技术细节，对于了解该酶的生物学功能及其在食品工业中的作用具有重要价值，同时也展示了我国在乳品产业技术研发方面的进展。