SPE-LC-MS技术：大肠杆菌胞内能量辅因子定量分析新方法

"该文是关于使用SPE-LC-MS技术定量分析大肠杆菌胞内能量辅因子的研究，由李竹翠、杨阿芳等人完成，并得到了高等学校博士学科点专项科研基金的支持。文章介绍了如何通过优化样品预处理方法，特别是固相萃取(SPE)技术，来提高对胞内ATP、ADP以及NAD系列辅因子的定量分析的准确性和灵敏度。" 在生物化学与分子生物学领域，研究细胞内的代谢过程至关重要，而能量辅因子如ATP（三磷酸腺苷）、ADP（二磷酸腺苷）、NAD（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）和NADH（还原型NAD）、NADP（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯）及NADPH（还原型NADP）是这些过程中关键的角色。这些辅因子参与氧化还原反应，为细胞提供能量和维持代谢平衡。 本文介绍的方法创新在于采用了固相萃取(SPE)技术对细胞提取液进行预处理，这一方法能够有效地去除复杂基质中的干扰成分，同时富集和纯化目标代谢物。SPE是一种常用的样品前处理技术，通过吸附剂对目标化合物的选择性吸附，可以实现对特定物质的分离和浓缩，尤其适用于微量或痕量分析。 超高效液相色谱(UHPLC)与质谱联用系统(MS)的应用进一步提高了分析的精度和灵敏度。UHPLC能提供更高的分离效率和更快的分析速度，而MS则通过检测分子的质量和电荷比，实现对化合物的精确鉴定和定量。这种SPE-LC-MS分析流程不仅适用于能量辅因子，还可能推广到其他内源性代谢物的分析，为细胞代谢组学研究提供有力工具。 该研究的重要性在于，它解决了胞内代谢物分析的一个关键问题——样品预处理的特异性。由于胞内代谢物种类繁多，物理化学性质各异，没有一种通用的预处理方法能适用于所有物质。本研究开发的特定富集方法有助于提升分析结果的可靠性，对于理解大肠杆菌及其他微生物的能量代谢机制，以及在生物工程、疾病研究和药物开发等领域都具有潜在的应用价值。 关键词：生物化学与分子生物学；辅因子；固相萃取；超高效液相色谱质谱联用系统 这项研究开发了一种针对大肠杆菌胞内能量辅因子的SPE-LC-MS定量分析技术，通过优化样品预处理，提高了检测的准确性和敏感性，为代谢组学研究提供了新的思路和方法。