比较HRPDAB-H2O2与胶体金示踪剂在蛋白抗原微阵列信号检测中的性能

本文研究了两种不同的示踪剂在蛋白质与抗原分子微阵列信号检测中的应用，即辣根过氧化物酶二氨基联苯胺双氧水（HRP-DAB-H2O2）和胶体金硝酸银对苯二酚系统。研究以氧化型琼脂糖凝胶膜为基质，构建了一种免疫学测定模式，用于检测固相的人免疫球蛋白G（IgG）、游离IgG以及自身抗体分子。作者比较了这两种示踪系统的原理和特性。 HRP-DAB-H2O2示踪系统利用酶促反应，辣根过氧化酶催化底物二氨基联苯胺氧化，生成蓝色产物，通过检测其颜色深浅来反映蛋白质或抗原的存在。这种方法的优点是操作相对简单，但可能受到背景信号的影响，且对低浓度信号的检测可能不敏感。 相比之下，胶体金免疫金银染色法（IGSS）利用胶体金标记的抗体与目标抗原结合后，再用硝酸银/对苯二酚显色，形成肉眼可见的金颗粒，从而实现高灵敏度的检测。IGSS法对固相IgG的最低检出限明显低于HRP-DAB-H2O2，可达0.05ng，对于血清游离IgG的检测，其敏感性更是高出HRP-DAB-H2O2至少10倍。这表明IGSS在低浓度检测上更具优势。 实验结果显示，尽管两种方法在重复性和一致性方面都表现良好，但在提高自身抗体总体检出率方面，胶体金示踪剂显示出更好的性能。特别是在14例HCV感染者的样本中，使用IGSS法检测自身抗体的总体检出率为38.6%，高于HRP-DAB-H2O2的31.4%。这表明在实际应用中，结合两种示踪剂的优势进行联合测试，可以显著提升自身抗体检测的准确性和灵敏度。 这项研究对蛋白质与抗原微阵列信号检测技术进行了深入探讨，提供了关于不同示踪剂选择的重要依据，尤其是在敏感性和特异性要求高的临床检测场景中，胶体金免疫金银染色法因其优越的性能可能成为首选。这对于推进微阵列技术在生物医学领域的应用具有重要意义。