药用植物合成银纳米粒子的绿色方法及其在杀幼虫活性中的应用

埃及基础与应用科学杂志5（2018）54完整文章几种药用植物对绿色银纳米粒子Syed Zameer Ahmed Khadera，Sidhra Syed Zameer Ahmeda，Sidhra，Jagadeeswari Sathyana，Mohamed Rafi Mahboobb，Kisore P.基肖尔？拉梅什？文卡特什？aa生物技术部，K.S. Rangasamy技术学院，K.S.R.Kalvinagar，Tiruchengode 637 215，泰米尔纳德邦，印度b印度泰米尔纳德邦Vellore Katpadi金斯顿工程学院人文科学系，邮编632059阿提奇莱因福奥文章历史记录：2017年9月26日收到2018年1月8日收到修订版，2018年2018年2月1日在线发布保留字：杀幼虫纳米银绿色合成叶酸A B S T R A C T用不同极性的溶剂提取苦叶下珠、番荔枝、大瓢虫和匍匐瓢虫的乙醇提取物，评价其杀幼虫活性。以不同浓度（ 1000 、 500 、 250 ppm ） 对 登 革 热 媒 介 、 埃 及 伊 蚊 和 日 本 脑 炎 （ JE ） 引 起 的 三 带 喙 库 蚊 （ Culextritaeniorhynchus）的三龄幼虫进行杀幼虫生物测定。结果表明，所有植物中存在的植物成分和次生代谢产物阐明了有效的杀幼虫活性。乙酸乙酯、石油醚和正己烷提取物对幼虫有明显的杀灭作用。类似地，这些植物进行银纳米颗粒的绿色合成，表征并进行其对引起疟疾的斯氏按蚊的采用紫外-可见光谱、傅立叶变换红外光谱、扫描电子显微镜对所合成的银纳米粒子进行了表征FTIR分析强烈支持生物还原合成的银纳米颗粒的封端行为，这反过来又赋予了合成的银纳米颗粒的高稳定性。合成的纳米粒子的平均尺寸小于1微米，最球形的形状与SEM分析。研究结果表明，平卧番荔枝和番荔枝具有有效的杀幼虫活性，而所有合成的纳米颗粒即使在非常低的浓度下也显示出剂量依赖性活性，并且研究结果表明，这些提取物和纳米颗粒可以是对抗这些蚊子的更好的药物©2018 曼 苏 拉 大 学 。 由 爱 思 唯 尔 公 司 制 作 和 主 持 这 是 一 篇 基 于 CC BY-NC-ND 许 可 证 的 开 放 获 取 文 章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。1. 介绍蚊媒疾病是一个主要的普遍健康问题，引起疟疾、登革热、日本脑炎、基孔肯雅热和淋巴丝虫病，这些疾病在印度更为流行。据报道，已有250万例疟疾病例报告，仅印度就占76%[1]。斯氏按蚊（Anophelesstephensi）是疟原虫属的一种引起疟疾的蚊子。大约400种已知的按蚊通常分布在除寒温带地区以外的任何地方。斯氏按蚊（Anophelesstephensi）是世界上主要的媒介昆虫，每年疟疾发病率的40-50%由其直接引起同样，埃及伊蚊作为登革热的传播媒介，已经在全球范围内造成了严重的公共卫生问题.在印度的虫媒病毒中，传播所有登革热病毒类型的病毒不断增加[3]。据报道，全球每年约有5000万这是一项艰巨的任务，*通讯作者。电子邮件地址：Sidhrazameer@gmail.com（新加坡）Syed Zameer Ahmed）。控制埃及伊蚊的繁殖，因为它是一种在淡水中繁殖的蚊子。而乙脑（JE）是由主要分布在南亚和东南亚的三带喙库蚊（Culextritaeniorhynchus）引起的[5]，据报道，每年约有30，000 - 50，000人死亡这些媒介主要在稻田灌溉水中繁殖，并以猪为扩增宿主。日本脑炎感染的症状是轻微的，有或没有明显的症状，但许多报告表明，某些患者会导致严重的疾病，其特征是体温升高、头痛、颈部僵硬、定向障碍、昏迷、癫痫发作、痉挛性瘫痪和死亡。随着蚊子引起的疾病数量的增加，蚊子是发展中国家的主要死亡来源，控制蚊子是当今的一件重要事情。植物来源的生物活性化合物作为抵御各种昆虫的防御剂发挥着重要作用。已经报道了多种植物具有杀虫化合物，并且使用植物来源的产品来控制蚊子幼虫已经被证明是传统的幼虫https://doi.org/10.1016/j.ejbas.2018.01.0022314- 808 X/©2018曼苏拉大学。由爱思唯尔公司制作和主持这是一篇基于CC BY-NC-ND许可证的开放获取文章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。可在ScienceDirect上获得目录列表埃及基础与应用科学杂志杂志主页：www.elsevier.com/locate/ejbasS.Z.A. Khader等人 /埃及基础与应用科学杂 志 5（2018）54-6255控制，因为它们与问题无关[6]。已经进行了几项研究，以使用植物制造生态友好的驱避剂和杀幼虫活性[7，8]。药用植物因其治疗价值而被发现是自古以来用于治疗许多疾病的替代药物。药用植物具有许多特性，使它们可用于治疗，它们是协同医学，支持医学和预防医学[9]。纳米技术应用于不同领域，如医疗保健、化妆品、药物基因递送、能源科学、光电子学、光催化剂性质[10，11]等。纳米颗粒为技术和环境问题提供了解决方案，并且还提供了高的表面积与体积比。纳米粒子的绿色合成有助于开发一种清洁、无毒、生态友好的方法.它们也在杀虫剂中找到了位置，如纳米材料杀虫剂。它们为害虫管理提供了绿色和有效的替代品，而不会损害自然。纳米颗粒的原子与原子的排列影响它们的大小、形状和取向，以特异性地作用于靶位点。纳米粒子具有更高的强度，化学反应性和高导电性，以及它们的物理，生物和化学性质。据报道，银纳米颗粒具有抗菌活性[12]，类似地，具有抗病毒活性[13]、抗真菌活性[14]。从微生物或植物来源合成的纳米颗粒可以通过使纳米颗粒更具生物相容性来潜在地消除这个问题，因此许多研究人员正在植物，藻类，真菌，细菌和病毒上进行生产。图1.一、用苦叶下珠提取物合成的银纳米颗粒的FTIR光谱。图三.使用平卧草提取物合成的银纳米颗粒的FTIR光谱。图二、（ a-c）SEM显微照片a）×1500 × 10 μ m; B）×5000 ×5 μ m; C）× 10，000 ×1 μ m，显示使用苦叶下珠提取物合成的银纳米颗粒。56S.Z.A. Khader等人 /埃及基础与应用科学杂 志 5（2018）54-62低成本、高能效、无毒的金属纳米颗粒生产[15]。银纳米颗粒的功效取决于颗粒大小和它们的形状。以前的研究表明，还原剂如硼氢化物得到较小的单分散银纳米粒子。柠檬酸盐等还原剂用量少，还原速率慢。纳米颗粒的化学合成导致有毒和低效的纳米颗粒。纳米粒子的绿色合成具有环境友好和毒性小的特点。纳米粒子的绿色合成取决于对无毒物质、溶剂和还原剂的选择以保证纳米银粒子的稳定性。该实验旨在验证民俗医学在控制疾病流行方面的应用。2. 材料和方法2.1. 植物材料采自Namakkal区Kolli山底部的苦叶下珠、番荔枝、大瓢虫和匍匐瓢虫的全株样品这些植物的这些学名使用数据库进行形态学鉴定，并根据其家族进行分类和认证。收集新鲜的通过使用电动搅拌器将叶子粗粉化，并单独储存在气密容器中以供进一步使用。2.2. 化学品和溶剂所有化学品和溶剂均为分析级，购自S.D.。Fine Chemicals，Mumbai and Fischer Inorganic and Aromatic Limited，Chennai，India.2.3. 浸提液的制备分别取苦叶下珠、番荔枝、大椰子和匍匐茎的干燥粉末样品，并与不同极性和非极性混合，然后在单独的容器中在室温下磁力搅拌过夜。通过过滤除去残余物。在60 ± 10 °C下在旋转蒸发器中减压浓缩滤液，得到浓缩的粗提取物，并将提取物储存在4 °C下以备将来使用而不变质[16]。2.4. 银纳米粒子AgNP通过Rajakumar和Rahuman解释的方法从整个植物材料（Phyllanthus amarus、Annona squamosa、Coccinia grandis和Bocctaprotrata）合成，[17]。图五.使用番荔枝提取物合成的银纳米颗粒的FTIR光谱。见图4。 (a-c)SEM显微照片a）×1500 × 10μm; B）×5000 × 5μm; C）× 10，000 × 1μ m，显示了使用平胸草提取物合成的银纳米颗粒。S.Z.A. Khader等人 /埃及基础与应用科学杂 志 5（2018）54-6257×图第六章（ a-c）SEM显微照片a）×1500 ×10 μ m; B）×5000 ×5 μ m; C）× 10，000 ×1 μ m，显示使用番荔枝提取物合成的银纳米颗粒。2.5. 收集蚊子幼虫斯氏按蚊、埃及伊蚊和三带喙库蚊3龄幼虫采自Cuddalore区Virudhachalam的ICMR医学昆虫中心（野外工作站）。幼虫饲养在盛有水和足够饲料的无塑料托盘中。 托盘用细棉布覆盖以避免污染。为幼虫提供25-27 °C和75-85%湿度的合适环境条件，并从每个笼中收集卵筏用于维持下一代。2.6. 杀幼虫活性根据WHO（1996）的指南进行测定，将幼虫加入到249 ml水和1.0ml制备的植物提取物中，保持五个重复。对照品将在不浸提的情况下保存，并将重复样品暴露24小时。然后报告存活幼虫的数量，以根据一式三份的平均值评估死亡率。活性较高的提取物将被考虑用于进一步研究。死亡率=（死亡幼虫数量/引入幼虫数量）100研究涉及每个样品5只幼虫。通过混合100 ml蒸馏水、0.4 ml丙酮、100 mg浸提液和0.02 ml吐温20（用于浸提液的完全溶解）制备贮备液（1000 ppm）。通过进一步稀释，获得浓度为1000、500、250 ppm的溶液。对于仅含溶剂而不含浸提液的所有样品，均保持阴性对照。使用商业化的liquidator作为三种浓度的阳性对照。图第七章使用大椰子提取物合成的银纳米颗粒的FTIR光谱。2.7. 剂量反应生物测定法按照Rajakumar和Rahuman，2011[18]的方法，对合成的纳米颗粒进行针对斯氏按蚊幼虫的杀幼虫活性。3. 结果3.1. 银纳米颗粒银纳米颗粒的合成通过使用UV、FTIR和SEM分析的颗粒的值和表征来证实3.1.1. 苦叶下珠的FTIR和SEM分析进行FTIR测量以鉴定负责封端和有效稳定的可能的生物分子。58S.Z.A. Khader等人 /埃及基础与应用科学杂 志 5（2018）54-62植物叶提取物合成纳米银颗粒。红外光谱分析表明，存在不同的功能基团，对应于蛋白质，生物碱，单宁，皂苷和其他植物代谢物。来自苦杏仁的AgNP的FT-IR光谱示于图1B中。1.一、特征吸收带，由于双金属，CA H在2930 cm-1处拉伸。在1638 cm-1处的谱带是由于胺的CA O伸缩，在1401 cm-1处的谱带是由于胺的NAO伸缩。在1326 cm-1处的谱带是由于二烷基的CAO伸缩，而1049 cm-1处的谱带是由于CA N伸缩.在614 cm-1处的谱带是由于芳香族CA H伸缩引起的。在3436 cm-1处出现的宽吸收带是水分子的OAHA苦玄参的银纳米颗粒的SEM显示单分散球形Ag NP的合成（图2）。显示使用植物提取物合成的银纳米颗粒的SEM图像证实了由P. amarus开发的银纳米结构。以P为原料制备的纳米银颗粒呈球形，粒径小于300nm。阿马鲁斯3.1.2. 平卧草的红外光谱和扫描电镜分析图3中示出了来自平足的AgNP的FT-IR光谱。在3385 cm-1处的谱带为羟基，H-键合OH伸缩。1610 cm-1处的谱带归属于酰胺。在1415 cm-1处的峰揭示了COO-从氨基的对称伸缩。在1049 cm-1处的峰是磷酸根离子，乙醇在617 cm-1处的峰。IR谱带证明了胺、醇、酚和芳族基团的存在，提出了某些蛋白质存在于前列腺叶甲中，其充当还原/加帽剂，并可能负责使用E. 平卧。SEM分析提供了对银纳米颗粒的形态和尺寸细节的进一步详细了解。SEM证实了银纳米结构的发展，并给出了来自Pastata Prostrata的银纳米颗粒的清晰图像（图4）。的图像显示了约1μ m的颗粒尺寸以及纳米颗粒的晶体结构。3.1.3. 番荔枝的FTIR和SEM分析来自番荔枝的AgNP的FT-IR光谱示于图5中。在3428 cm-1处的峰是由于胺的NA H基团。在酯的1627 cm-1处出现C@ O和CA H基团，烯烃。胺和烷烃在1411 cm-1处出现NA H和CA H基团酯的C@ O出现在1050 cm-1处。在566c m-1处出现的C nC基团是炔。显示由番荔枝提取物合成的高强度银纳米颗粒的SEM图像进一步证实了银纳米结构的发展。合成的Ag NP是单分散的、球形的，尺寸范围在100和200 nm之间，并且它们非常均匀地分布而没有任何团聚（图6）。合成的纳米颗粒通过封端剂（植物植物化学物质）精细稳定，因此它们甚至在聚集体内也不直接接触，如SEM图像中所见。3.1.4. 大瓢虫的FTIR和SEM分析图7中示出了来自大瓢虫的AgNP的FT-IR光谱。通过C还原形成的Ag纳米颗粒观察到的峰。 grandis，在1090 cm-1（醚键），1404 cm-1（@NH）和1639 cm-1（酰胺I）表明存在叔-在银纳米颗粒表面附着有生物碱和萜类化合物红外光谱的分析也为生物分子中存在不同的官能团提供了思路。显微照片显示了约200 nm的颗粒尺寸以及纳米颗粒的晶体结构，观察到在细胞表面上均匀分布的银纳米颗粒。然而，这并不表明所有的纳米颗粒都是见图8。 (a-c)SEM显微照片a）×1500 × 10μm; B）×5000 × 5μm; C）× 10，000 × 1μ m，显示了使用大椰子提取物合成的银纳米颗粒。S.Z.A. Khader等人 /埃及基础与应用科学杂 志 5（2018）54-6259见图9。(a-d)合成的AgNP（a-苦味叶下珠，b-匍匐叶下珠，c-番荔枝，d-大椰子）的XRD图案显示出结晶银的小面。附着在细胞表面，因为分散在溶液中的那些也可以沉积在细胞表面上。SEM结果（图） 8）表明所合成的AgNPs为立方体形，粒径为300 - 1 μ m，在Coccinagrandis水溶液中分散良好。3.1.5. x射线衍射分析具有苦味叶下珠、匍匐叶下珠、番荔枝、大椰子的AgNP的XRD图案示于图9（a-d）中。衍射图象显示出两个h值出现的峰，分别对应于 银的 面斜 立方结 构的 （ 111 ） 和（ 200 ） 面， 与标 准卡片（JCPDS 89意外的峰可能是由于AgNP表面上发生的生物有机相的结晶。3.2. 陆生植物对埃及伊蚊的杀幼虫活性测定苦叶下珠、番荔枝、平卧叶甲和大瓢虫对埃及伊蚊的幼虫死亡率见图。 10. 对苦味叶下珠的分析表明，石油醚和苯提取物在1000 ppm时的最大活性为46.66%，死亡率为39.33%，而己烷提取物的最小活性为2.6%。同样，E.在500 ppm时活性最高，乙酸乙酯提取物在1000 ppm时活性最高，为93.33%。在甲醇和水提取物中观察到其最低活性，约为6.66%。番荔枝的石油醚和乙酸乙酯提取物的致死率最高，分别为66.66%和73.33%。其水提取物和苯提取物显示最低活性为13.33%。只有C.在1000 ppm浓度下，巨桉的死亡率为33.33%。该植物在250和500 ppm浓度的己烷、甲醇和苯提取物中没有表现出活性见图10。埃及伊蚊幼虫对陆生植物提取物的死亡率60S.Z.A. Khader等人 /埃及基础与应用科学杂 志 5（2018）54-62见图11。 三带喙库蚊幼虫对陆生植物浸提液的致死率见图12。 合成的Ag NPs对斯氏按蚊的杀幼虫活性。S.Z.A. Khader等人 /埃及基础与应用科学杂 志 5（2018）54-6261表1合成的AgNPs对斯氏按蚊的杀幼虫活性。纳米颗粒LC50（UCL-LCL）LC90（UCL-LCL）v2（df = 5）Pa银纳米粒子2.819（3.3626.204（10.798-4.731）0.331作为AgNPs2.332（2.8096.279（12.5451.813EpAgNPs2.735（3.2466.291（10.3072.256CgAgNPs2.509（2.9675.843（10.0143.881对照组-零死亡率。P 0.05水平显著。LC50：杀死50%暴露幼虫的致死浓度，LC90杀死90%暴露幼虫的致死浓度，UCL置信上限，LCL置信下限，v2卡方; df自由度。3.3. 陆生植物对三带喙库蚊幼虫的生物测定苦味叶下珠、番荔枝、平卧石蚕蛾和大瓢虫对三带喙库蚊幼虫的死亡率见图。 十一岁分析表明，苦叶下珠在1000 ppm浓度的乙酸乙酯和己烷提取物中具有100%的死亡率，但石油醚提取物显示约93.33%的死亡率。其水提物和甲醇提取物的活性最低，约为6.6 - 13%。E.在250、500 - 1000 ppm的石油醚、乙酸乙酯、己烷和甲醇提取&物中，prostrata显示100%的死亡率。其苯提取物和水提取物的最低活性分别为26%和33.3%。番荔枝在石油醚、乙酸乙酯和正己烷提取物中的死亡率均为100%。其苯和甲醇提取物具有中等活性，死亡率分别为80%和53%。石油醚浸提液对大瓢虫的致死率为100%，苯浸提液对大瓢虫的致死率为86.66%。苯提取物显示出66%的中等活性。其水和乙酸乙酯提取物在1000 ppm浓度下显示出20%的最小3.4. 不同浓度纳米颗粒对斯氏来自图12的图示证明了合成的纳米颗粒对斯氏按蚊的杀幼虫活性。苦叶下珠纳米颗粒在4ppm浓度下的暴露表现出73%的死亡率，而在3ppm下表现出53%的活性，类似地，基于番荔枝的纳米颗粒在4ppm浓度下表现出80%死亡率的有效活性，在3ppm下表现出60%死亡率。在4ppm接触组中，平卧萤叶甲的死亡率为73%，在3 ppm接触组中，显示出52%的活性。同时，在4ppm剂量下的椰子纳米颗粒显示出最大活性，为83%，在3ppm暴露下为52%。所有测试的NP即使在较低浓度下也显示出有效的杀幼虫活性，结果示于表1中。4. 讨论4.1. 银纳米颗粒红外光谱研究证实，蛋白质的氨基酸残基和多肽的羰基具有较强的结合金属的能力，因此蛋白质最有可能在金属纳米颗粒表面形成一层包覆层（即金属纳米颗粒表面的Ag NP的封端）以防止颗粒的团聚，因此，纳米颗粒在介质中稳定[19]。在450-500 nm处获得小的凹陷FTIR证实了不同官能团的存在，吸收了红外辐射的特征频率[20]。构成大量均匀尺寸的纳米颗粒的SEM分析显示，通过用叶提取物还原的Ag+离子主要是球形的，它们分布得很好，没有任何团聚[9]。在低放大倍数下，SEM图像显示尺寸范围为200至300nm的单分散NP。XRD图清楚地表明，在当前合成中形成的AgNP本质上是结晶的。峰的锐化清楚地表明颗粒处于纳米晶中。纳米颗粒的XRD图谱表现出几种不同的尺寸依赖性特征，导致异常的峰位置、强度和宽度。这些峰的出现是由于提取物中存在植物化学化合物。较强的平面表明Ag NPs是生物合成中的关键元件。所有样品中峰位置的微小偏移表明晶体结构中存在一些应变[21]。4.2. 杀幼虫活性很明显，由于病媒蚊子对传统杀虫剂产生了抗药性，全球对病媒控制发出了警报因此，本研究的重点是开发药用植物如苦叶下珠、番荔枝、大椰子和红球藻的杀幼虫剂，并验证其传统用法。以全草为原料，尝试绿色合成纳米银颗粒，并研究其对蚊幼虫的致死作用。4.2.1. 陆生植物对埃及对埃及伊蚊的杀幼虫活性进行了评价，结果显示所有陆生植物的乙酸乙酯和石油醚提取物均有效。乙酸乙酯、石油醚和正己烷作为溶剂时，平卧草提取物表现出较高的死亡率番荔枝对伊蚊幼虫有依赖性的活性。苦叶下珠只有石油醚和乙酸乙酯提取物具有较强的活性。对伊蚊的活性最低的是大瓢虫。 我们的研究与先前使用药用植物进行杀幼虫活性的研究一致[22]。还发现，提取物表现出浓度依赖性活性，即。死亡率随提取物浓度增加而增加。该结果与先前探索具有杀虫特性的植物化学物质的存在所支持的剂量依赖性活性的报告一致[22，23]。4.2.2. 陆生植物对三带喙库蚊幼虫的生物测定在用库蚊幼虫进行的试验中，陆生植物的石油醚、乙酸乙酯提取物均有效。在石油醚、乙酸乙酯、正己烷和甲醇提取物中活性最高。平卧的番荔枝和苦叶下珠乙酸乙酯和石油醚提取物对库蚊幼虫具有明显的杀灭作用。以前的报告表明，植物提取物的生物活性可能是由于植物中存在的各种化合物，包括酚类，萜类化合物和生物碱[24]。本研究的发现揭示了这些植物提取物中存在的植物成分在所测试的植物提取物中，扁叶番荔枝和番荔枝对库蚊幼虫表现出有效的杀幼虫活性，并且与Raheli等人的先前报道相当，[25]代表直立木蓝叶提取物的杀幼虫活性。62S.Z.A. Khader等人 /埃及基础与应用科学杂 志 5（2018）54-624.3. 陆生植物纳米颗粒提取物对斯氏按蚊在不同浓度的纳米颗粒提取物下斯氏按蚊的死亡率结果示于图6中。大瓢虫AgNPs对斯氏按蚊的致死率最高，番荔枝AgNPs的活性次之，苦叶下珠AgNPs和平卧叶下珠AgNPs的活性最低。 结果表明，即使在4 ppm的极低浓度下，也有最大死亡率。研究人员已经报道，合成的AgNP可能对引起疟疾的载体具有显著影响，并且我们的结果与之前的结果一致[17，18，26]。[27]报道了使用F.总状花序对传病媒介幼虫的杀灭活性最高，这与我们的研究结果相一致。5. 结论本研究结果表明，民间药物具有协同作用，可用于多种疾病，且无任何副作用。在所测试的植物中，所有植物在不同溶剂中表达活性可能是由于它们中存在植物成分类似地，基于植物的纳米材料的使用即使在较低浓度下也表现出剂量依赖性死亡率，因此对于开发清洁、无毒和环境可接受的“绿色方法”来生产金属纳米颗粒以改善生活并且可以阻止由蚊子幼虫引起的不良疾病的传播将是有利的确认作者感谢K.S.的管理和负责人。Tiruchengode的Rangasamy技术学院为成功开展这项研究工作提供了基础设施和设施。引用[1] Kumar A，Valecha N，Jain T，Dash AP.印度疟疾负担：回顾与展望。美国热带医学卫生杂志2007;77（6）：69-78。[2] 放大图片作者：A. 沙棘杀幼虫活性评价。埃及伊蚊和斯氏按蚊的叶提取物（双翅目 ： 蚊 科 ） 。 中 东 JSciRes2013;13 （ 5 ） ： 703-9.doi ：https://doi.org/10.5829/idosi网站。 mejsr.2013.13.5.2939。[3] Fulmali PV ， Walimbe A，Mahadev PV. 登革热媒介埃及伊蚊（ Aedes aegypti（L.）在印度马哈拉施特拉邦康坎地区。印度医学研究杂志2008;127：589-601。[4] MurrayNE，Quam MB，Wilder Smith A. 登革热流行病学：过去、现在和未来展望。临床流行病学2013;5（1）：299-309。[5] Keiser J，Maltese MF，Erlanger TE，Bos R，Tanner M，Singer BH，et al.EffectofirrigatedriceagricultureonJapaneseencephalitis ， includingchallenges andopportunities integrated vector management. 热 带 学 报 2005;95（1）：40-57。[6] Borase HP，Patil CD，Salunkhe RB，Narkhede CP，Salunke BK，Patil SV.植物合成的纳米银：一种有效的杀蚊生物剂. 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