植物乳杆菌CCFM8610缓解肠易激综合征的临床试验

工程7（2021）376微生态学研究植物乳杆菌CCFM8610缓解肠易激综合征并预防肠道菌群失调：一项随机、双盲、安慰剂对照的初步临床试验刘扬a，b，余新杰c，余雷雷a，b，田峰伟a，b，d，赵建新a，b，张浩a，b，e，f，g，钱龙h，王群h，薛正清h，翟奇晓a，b，d，刘伟，陈伟a，b，e，i江南大学食品科学与技术国家重点实验室，无锡214122b江南大学食品科学与技术学院，无锡214122c新加坡华侨中学（学院）269734，新加坡d江南大学益生菌国际联合研究实验室，无锡214122e江南大学功能食品国家工程研究中心，无锡214122f无锡转化医学研究中心和江苏省转化医学研究院无锡分院，无锡214122，中国g江南大学食品生物技术研究所，江苏中国盐城亭湖人民i北京工商大学食品营养与人类健康研究中心，北京100048阿提奇莱因福奥文章历史记录：收到2020年2020年5月17日修订2020年6月18日接受2020年12月24日在线提供保留字：肠易激综合征肠易激综合征丁酸临床试验A B S T R A C T腹泻型肠易激综合征（Irritable bowel syndrome with diarrhea，IBS-D）是一种以腹泻等复杂临床症状为主要表现的慢性肠道功能障碍，对患者的日常生活和精神状态有很大影响一些研究报告说，摄入益生菌可 以 显 著 缓 解 多 种 肠 道 疾 病 。 本 研 究 旨 在 探 讨 益 生 菌植 物 乳 杆 菌 （ Lactobacillus plantarum ， L.）plantarum）CCFM8610，具有多种健康促进作用。该研究是一项为期12周、随机、双盲、安慰剂对照的初步临床试验。 75名患者被随机分配接受安慰剂、低聚糖或L。 plantarum CCFM 8610（1 × 10 10菌落形成单位（CFU）/天），包括2周的导入期、8周的干预期和2周的随访观察期。采用IBS症状严重程度量表（IBS-SSS）和IBS生活质量量表（IBS-QOL）对患者在干预期结束时测量肠道微生物群组成和多样性的变化口服L.植物CCFM 8610显著降低IBS-SSS和IBS-QOL评分，降低IBS-D症状严重程度，恢复肠道微生物群多样性，降低与腹胀相关的甲烷短杆菌属的相对丰度，并增加丁酸产生菌属的相对丰度，包括厌氧柄菌属（Anaerostipes）、厌氧干菌属（Anaerotruncus）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）、丁酸单胞菌属（Butyricimonas）和气味杆菌属（Odoribacter）。 这些发现表明，摄入L。 plantarum CCFM 8610可显著缓解IBS-D患者的临床症状和肠道微生物群失调。L. plantarum CCFM8610可能与肠中丁酸产生基因相对丰度的增加有关。©2021 THE COUNTORS.由爱思唯尔有限公司代表中国工程院和高等教育出版社有限公司出版。这是一篇CCBY-NC-ND许可下的开放获取文章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）中找到。1. 介绍肠易激综合征（IBS）是一种慢性肠道疾病，通常伴有肠道功能障碍，*通讯作者。电子邮件地址：zhaiqixiao@sina.com（问：Zhai）。不会造成器官损伤[1]。IBS的全球患病率目前超过人口的10%[2]。由于这种高患病率和缺乏治愈方法，IBS给各国的医疗保健系统带来了巨大的负担。根据患者粪便的特征IBS-D是IBS的一种亚型，其主要症状包括严重腹泻，https://doi.org/10.1016/j.eng.2020.06.0262095-8099/©2021 THE COMEORS.由爱思唯尔有限公司代表中国工程院和高等教育出版社有限公司出版。这是一篇基于CC BY-NC-ND许可证的开放获取文章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。可在ScienceDirect上获得目录列表工程杂志首页：www.elsevier.com/locate/engY. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376377·×反复腹痛和腹胀，排便习惯改变[4]。由于IBS-D的临床症状比其他IBS亚型更紧迫，因此IBS-D患者的饮食和日常活动受到更多限制[5]。而且，在各种IBS亚型的患者中，IBS-D患者通常要进行十倍以上的检查才能确诊，因此诊断费用通常昂贵[6]。随着社会的发展，环境污染和精神压力也在增加[7，8].这种社会状况进一步导致IBS-D的流行。基于这些情况，IBS-D患者经历更显著的精神和经济压力。因此，必须尽快找到有效的治疗IBS-D的方法。多项研究表明IBS-D患者的许多生理特征发生了显著变化。IBS-D患者结肠中环氧合酶-2和前列腺素E2的蛋白表达水平显著高于健康对照受试者，这可导致内脏过敏症状和加重的功能性肠道疾病[9]。IBS-D患者肥大细胞的激活导致大量类胰蛋白酶和组胺释放，这加剧了闭合蛋白的降解并增加了肠道通透性[10]。此外，IBS-D患者还表现出严重的肠道微生物群障碍。在IBS-D患者的微生物群中，厚壁菌门和变形菌门的丰度显著增加，拟杆菌门的丰度降低[11]。在属水平上，几个属的丰度，如双歧杆菌属、粪杆菌属和瘤胃球菌属，也显示出显著变化[12]。益生菌是在人体内定植并发挥有益作用的活微生物，由于其被普遍认为是安全的，因此通常用于缓解各种疾病[13]。多个动物模型已经证明，益生菌可以缓解肠道菌群失调，调节免疫反应，增强肠道屏障功能，抑制内脏高敏感性[14在一些临床试验中，一些益生菌已被证明可以有效缓解IBS。据报道，丁酸梭菌可以减少IBS患者的排便频率，并改善其脂肪酸代谢[18]。两歧双歧杆菌干预8周可显著缓解腹痛，降低IBS的严重程度[19]。补充长双歧杆菌可显著减轻IBS患者的抑郁情绪，提高其生活质量[20]。摄入嗜酸乳杆菌四周后，IBS患者的腹胀症状显著减轻，同时排便习惯正常化[21]。这些证据表明，益生菌作为IBS的潜在治疗方法正在受到关注。植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum L.植物）CCFM8610是益生菌菌株以前分离发酵蔬菜具有优越的生理特性。体外实验表明，L.植物CCFM8610经模拟胃肠环境处理后，存活率为83.18% ± 0.34%，具有菊粉、低聚果糖、低聚半乳糖，一一代时间共轭亚油酸转化率为（124.2 ± 4.33）min为57.39% ± 1.08%[22]。 与其它乳酸杆菌菌株相比L. plantarumCCFM8610在这些生理特性方面具有显著的优势。这些优良的生理特性有助于该菌株发挥保健作用in vivo.在动物实验中，L.已经证明植物CCFM 8610显著增加闭合小带（ZO）-1、闭合蛋白和紧密连接蛋白-1的表达，从而恢复肠屏障功能[23]。 在结肠炎模型中，L. plantarum结肠，并抑制核因子（NF）-κB信号通路的激活，以缓解肠道炎症[22]。临床试验也表明，补充L. plantarum CCFM8610显著恢复肠道微生物群多样性并改善肠道微生物群组成[24]。因此，我们认为该菌株具有缓解IBS-D患者临床症状的潜力。 为了验证这一假设，我们设计了一项随机、双盲、安慰剂对照的初步临床研究，以调查L。plantarum CCFM 8610在缓解IBS-D中的作用。研究设计和结果为益生菌作为缓解IBS-D症状的治疗提供了新的证据，为更广泛地探讨益生菌治疗缓解IBS的机制奠定了基础。2. 材料和方法2.1. 研究设计和伦理声明该研究是在中国江苏盐城亭湖人民医院进行的一项为期12周的随机、双盲、安慰剂对照的初步临床研究。研究设计和伦理声明已获得盐城市亭湖人民医院伦理委员会批准ChiCTR 1800014886）。本研究按照赫尔辛基宣言进行，并获得每名参与者的知情同意书。2.2. 研究人群本研究的患者招募于2018年2月和3月进行。根据Niv等[25]的研究，我们制定了本研究的入选和排除标准。本研究招募了年龄至少为18岁且诊断为IBS-D的患者。两名消化科医生根据罗马III标准评估患者的IBS-D症状。此外，患者需要同意提供知情同意书。但排除了以下人群：感染性疾病或胃肠道肿瘤患者;既存炎症性肠病或其他肠道疾病患者;过去一个月内服用过抗真菌药物或抗生素的患者;过去一个月内服用过微生态制剂、膳食补充剂或益生菌的患者;经常饮用酸奶或益生菌饮料的患者;最近饮食习惯发生重大变化的患者;以及怀孕或希望怀孕的女性。在研究过程中，任何未能按时服用益生菌、未能保留粪便样本或未能完成调查问卷的患者都被考虑在内自动撤回。2.3. 研究产品本研究中使用的产品包括安慰剂产品、低聚糖产品和L。plantarumCCFM8610产品。所有产品均为粉末状，外观和包装均相同（2 g包装）。安慰剂产品的成分为麦芽糖糊精。低聚糖产品由5%麦芽糊精和低聚糖（7.8%菊粉、15.6%低聚半乳糖和71.6%低聚果糖）组成。L.plantarum CCFM8610产品中含有L. 植物CCFM8610（5%，> 5 × 10-9菌落形成单位（CFU）/克）和与寡糖产品等量的寡糖。所有产品均需在4 °C下储存。活菌量CCFM8610降低促炎细胞因子的表达如白细胞介素（IL）-6和TNF-α，yhttp://www.chictr.org.cn/index.aspxY. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376378-L. 3个月内，产品中植物病原菌CCFM 8610的残留量大于5×109CFU·g-1。2.4. 随机化和干预最初，本研究共招募了96名患者体检后，21名患者因不符合研究要求而被排除。其余75例患者按计算机随机数字表随机分为3组（安慰剂组、寡糖组、L. plantarum CCFM8610组），每组25例。研究总时长为12周，其中导入期为2周（第1周和第2周），干预期为8周（第3-10周），随访观察期为2周（第11周和第导入期的目的是让患者检查他们的IBS-D症状。要求每组患者在干预期间每天服用相应的产品（2 g）在随访观察期间，患者停止服用益生菌，但被要求报告任何不良健康状况。此外，在整个研究过程中，要求患者避免服用抗生素;任何与胃肠道问题相关的药物;或其他益生菌、益生菌饮料、酸奶、微生态制剂或膳食补充剂。患者还被要求不要在饮食习惯上做出重大改变，也不要参加其他临床试验。2.5. 问卷调查根据Niv等[25]的研究，本研究采用IBS症状严重程度量表（IBS-SSS）和IBS生活质量量表（IBS-QOL）对IBS-D患者的临床症状和生活质量进行调查。在医生的帮助下，患者在第3、7和11周报告了他们的IBS-SSS评分和IBS-QOL评分。2.6. 粪便样本采集和粪便微生物群分析本研究安排在第24周采集一次粪便样本，11.收集新鲜粪便样品并在80 °C下储存。根据FastDNA®Spin试剂盒（MP Biomedicals Ltd.，美国）。根据Wang等人[26]描述的方法进行肠道微生物群的聚合酶链反应（PCR）和测序。 主成分使用主成分分析（PCA）和线性判别分析效应量（LEfSe）分析来分析肠道微生物群中的物种2.7. 统计分析本研究中符合正态分布的测量数据表示为平均值±标准差（SD）。采用单因素方差分析（ANOVA）对结果进行分析，然后采用Tukey本研究中不符合正态分布的测量数据表示为中位数（四分位距）。采用非参数检验对结果进行分析。Friedman秩和检验用于确定IBS-SSS和IBS-QOL问卷数据的统计学显著性，因为它们的样本具有配对性质Kruskal-Wallis ANOVA用于确定肠道微生物群数据的统计学显著性，计数数据直接表示为数字。采用卡方检验确定患者原始数据的统计学显著性，采用用于确定严重程度的统计学显著性IBS在不同的人群中。p值小于0.05被认为是统计学显著的。3. 结果3.1. 患者和基线特征63例患者完成了研究。12名患者失访并从研究中排除（图1）。各组患者的主要数据见表1。各组的基线特征无显著差异。3.2. L的影响。plantarumCCFM 8610对IBS-D临床症状和IBS-D严重程度的影响IBS-SSS问卷评分在8周干预期后发生显著变化（表2）。服用pla-cebo的患者报告其排便习惯有显著改善（p0.05），但这种改善仅发生在干预期的前四周，最后四周未见改善。此外，在8周的干预期间 ， 该 组 的 IBS-SSS 总 分 没 有 显 著 变 化 （ p> 0.05 ） 。 L.plantarumCCFM8610组在补充L. plantarum CCFM8610，并在8周内持续改善（p <0.05）。治疗8周后，L.植物CCFM8610组患者显著降低（p0.05<）。低聚糖组的患者没有显示出任何显著的IBS症状改善（p> 0.05）。有严重IBS症状的患者人数在计划中，cebo组在干预8周后增加（表2）。第3周与第11周出现不同症状的患者数差异无统计学意义（p> 0.05）。低聚糖组出现不同症状的患者数与对照组相比无显著性差异（p> 0.05）。然而，经过八周的治疗，许多中度症状的患者谁摄入L。plantarum CCFM8610仅报告了轻度症状。此外，所有在L.植物CCFM8610组症状改善至中度。这表明 L 。 plantarum CCFM8610 有 效 地 减 轻 了 总 体 IBS 症 状 （ p<0.05）。3.3. L的影响。plantarumCCFM 8610对IBS-D患者生活质量的影响IBS-QOL调查的结果表明，不同产品的效果非常不同（表2）。安慰剂组患者的IBS-QOL总评分未报告任何显著变化。然而，服用安慰剂后，他们对健康的担忧减少（p0.05）。低聚糖组也报告了相同的结论（p0.05），低聚糖组的患者还报告了他们对人际关系的担忧显著减少（p0.05）。然而，该组患者的总IBS-QOL评分（包括情绪 评 分 、 活 动 干 扰 评 分 和 食 物 回 避 评 分 ） 在 第 7 周 显 著 增 加（p0.05）。安慰剂组的部分分项目（如情绪、体像、人际关系）也出现了类似的结果，但变化无统计学意义。到第11周，评分恢复至基线水平。这表明IBS-D症状显著影响生活质量，Y. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376379Fig. 1.患者流程图。表1各组患者的基线特征。女/男11/9 9/11 9/14 0.907吸烟人数饮酒人数6 6 5 0.777年龄、身高、体重和体重指数（BMI）数据采用单因素方差分析;性别、吸烟和饮酒数据采用卡方检验。干预期。与安慰剂和低聚糖相比，L.植物CCFM8610显著降低了IBS对患者生活质量的影响。L. 植物CCFM8610组在情绪控制、饮食控制、社会反应和总体生活质量方面有显著改善（p0.05）。3.4. L的影响。植物CCFM 8610对IBS-D患者肠道微生物群多样性L.患者的Simpson指数和Shannon指数。 plantarum CCFM8610组中的那些显著高于安慰剂组中的那些（图1A和1B）。 2（a）和（b））。 这表明L. plantarum CCFM8610增加了肠道微生物群的多样性。低聚糖治疗没有显著效果。各组中属水平的肠道微生物群的相对丰度显著不同（图2（c））。安慰剂组普雷沃菌属相对丰度最高所有种类的动物。然而，用益生菌或寡糖处理显著改变了肠道微生物群组成。与其他类群相比，低聚糖类群中几个属的相对丰度显著增加口服L. plantarum CCFM8610导致双歧杆菌的相对丰度更高。PCA的结果表明，补充低聚糖或益生菌可以改变肠道微生物群的组成（图1）。 3（a））。然而，在8周的干预后，各组之间肠道微生物群的变化各不相同与安慰剂组相同，益生菌和低聚糖的摄入显著增加了拟杆菌属的相对丰度，并降低了普雷沃氏菌属的相对丰度（图1A和1B）。3（b）-（d））。在L.在植物CCFM8610类群中，瘤胃球菌属和副拟杆菌属等几个属的丰度显著增加。我们还发现，在L.plantarum CCFM8610组（图11）。 3（c））。特性安慰剂组寡聚体L.植物CCFM8610组p值（n= 20）（n= 20）（n= 23）年龄（岁）48.95 ± 9.3851.10 ± 15.6348.57 ± 11.140.783年龄范围（岁）32–6727–7929–71身高（cm）167.10 ± 9.11166.25 ± 10.05165.82 ± 7.540.889重量（kg）70.91 ± 13.0969.44 ± 15.5369.34 ± 13.280.930体重指数（kg·m-2）25.42 ± 4.5024.90 ± 4.0825.14 ± 4.140.919Y. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376380表2第3、7和11周时的IBS-SSS问卷评分和IBS-QOL问卷评分。特性安慰剂组（n= 20）寡聚体（n= 20）L. 植物CCFM8610组（n= 23）第3第7第11p-第3第7第11p-第3第7第11p-值值值IBS-SSS总分二百（八十）一百九十（七十）一百八十（五十五）0.061一百八十（一百零五）一百八十（一百）一百六十（七十五）0.249一百六十（八十）一百六十（四十）一百四十（六十）0.013腹痛四十（二十）三十（二十）三十（二十）0.905二十（二十）二十（二十）二十（二十）0.405二十（二十）二十（二十）二十（二十）0.559腹痛频率 二十（二十）三十（二十）四十（二十）0.497四十（二十）四十（四十）四十（三十五）0.581二十（二十）四十（二十）二十（二十）0.646腹胀四十（二十）40（0）四十（二十）0.313二十（二十）二十（二十）二十（二十）0.552四十（二十）四十（二十）20（0）0.012排便习惯满意度六十（二十）40（0）40（0）0.010四十（三十五）四十（二十）四十（二十）0.249四十（二十）四十（二十）二十（二十）0.001生活干扰四十（十五）四十（二十）四十（三十五）0.138四十（二十）四十（二十）四十（二十）0.47240（0）40（0）二十（二十）0.003重度1-30.5391-00.3692-00.001症状中度感染人数10-910-89-5症状轻度症状9例-89-1212-18IBS-QoLIBS-QOL总分9.4112.948.230.0585.008.824.710.0047.655.884.120.008（6.76）（9.56）（7.06）（8.38）（14.56）（12.06）（11.76）（上午10时）（9.41）情感7.5012.506.250.0661.257.502.500.0275.005.002.500.034（7.50）（14.38）（6.88）（6.88）（17.50）（7.50）（12.50）（上午10时）（五时）活动干扰11.4314.2911.430.2325.7111.437.140.0098.575.715.710.229（19.29）（15.00）（13.57）（12.86）（19.29）（14.29）（14.29）（14.29）（17.14）身体形象7.5015.0010.000.0515.0010.005.000.3445.005.000（15.00）0.169（16.25）（20.00）（13.75）（23.75）（上午10时）（20.00）（20.00）（上午10时）健康隐忧16.6713.336.670.04713.3313.336.670.0066.676.676.670.064（20.00）（18.33）（6.67）（23.33）（13.33）（13.33）（20.00）（6.67）（13.33）食物回避13.3323.3320.000.3316.6716.676.670.00213.3313.336.670.014（6.67）（20.00）（6.67）（20.00）（13.33）（20.00）（13.33）（13.33）（13.33）社会反应2.505.000（5.00）0.0960（10.00）0（13.75）0（5.00）0.2985.000（15.00）0（5.00）0.043（五时）（13.75）（15.00）性生活5（20.00）0（20.00）0（10.00）0.9310（17.50）0（10.00）0（10.00）0.5420（10.00）0（0）0（0）0.108人际关系 0（6.67）上午10时（13时33分）0（6.67）0.0880（13.33）0（11.66）0（5.00）0.0306.67（13.33）0（13.33）0（13.33）0.212IBS的严重程度由IBS-SSS总分确定。轻度症状75-175分，中度症状176-300分，重度症状> 300分。括号中的数字表示数据的四分位数范围Y. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376381图二.肠道菌群α多样性和不同类群中主要细菌属的相对丰度。(a)Simpson指数;（b）Shannon指数;（c）相对丰度> 0.001的细菌属百分比热图。所有资料以单因子变异数分析及Tukey多重比较检定进行统计分析。字母a和b表示统计学显著差异（p0.05）。Y. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376382图3.第三章。不同群体肠道菌群组成的主成分分析和LEfSe分析（a）肠道微生物群的主成分（PC）分析;（b）安慰剂组和寡糖组属水平的最小判别分析（LDA）评分;（c）安慰剂组和寡糖组属水平的LDA评分。 plantarum CCFM 8610类群;3.5. L的影响。plantarumCCFM 8610对IBS-D患者中丁酸产生菌属和腹胀相关菌属相对丰度的影响厌氧柄菌属、厌氧干菌属、双歧杆菌属、丁酸单胞菌属和气味杆菌属的细菌具有显著的丁酸生产能力，并且在干预后相对丰度也发生了显著变化（图1A和1B）。4（a）-（e））。较安慰剂组，仅L. 植物CCFM8610组显著增加了厌氧柄菌属、厌氧干菌 属、 双 歧 杆 菌 属 、 丁 酸 单 胞 菌 属 和 气 味 杆 菌 属 的 相 对 丰 度（p<0.05）。甲烷短杆菌的相对丰度与肠道中气体口服L. plantarumCCFM8610能显著降低相对丰度甲烷短杆菌属（图4（f）;p0.05）。低聚糖的处理可以调节一些蛋白质的相对丰度，Y. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376383见图4。丁酸产生菌属与胃胀相关菌属的相对丰度（a）厌氧柄菌属;（b）厌氧干菌属;（c）双歧杆菌属;（d）丁酸单胞菌属;(e)气味杆菌属;（f）甲烷短杆菌属。所有数据均通过Kruskal-Wallis ANOVA检验进行分析字母a、b和c表示统计学显著性差异（p0.05）。一般，但没有显着差异与安慰剂治疗。4. 讨论本研究旨在研究细菌L. plantarum CCFM8610，我们在先前的研究中筛选的具有多种健康促进功能的益生菌菌株。我们设计了一项随机、双盲、安慰剂对照的初步临床试验，分析了L. plantarum CCFM 8610用于减轻IBS-D的临床症状，改善患者的生活质量，并缓解肠道微生物群失调。在这项研究中，患者被分为三组，并给予三种研究产品。 在L. 对于植物CCFM8610产品，添加低聚糖作为佐剂，因为据报道低聚糖可以调节免疫应答并促进肠道中有益微生物组的增殖[27，28]。然而，寡糖是否可以减轻IBS-D一直存在争议[29，30]。因此，我们成立了一个单独的小组来研究寡糖对减轻IBS-D的作用。结果表明，低聚糖对IBS-D无缓解作用。这表明L. plantarum CCFM 8610产品对IBS-D的作用来自益生菌菌株L. plantarum CCFM8610。IBS-D是IBS的一种亚型，其严重程度受患者的生理状态、心理状态、饮食习惯和其他环境因素的影响很大与IBS的其他亚型相比，IBS-D通常会引起频繁的腹痛和腹胀，不良的排便习惯，严重的活动障碍，苛刻的环境条件，以及严重的过敏反应。食物避免和高治疗成本[31]。此外，IBS-D的临床症状极大地损害了患者由于这些因素，IBS-D患者的生活质量通常很低[5]。探讨L.采用CCFM 8610对IBS-D患者的生活质量进行评价，在研究过程中，我们设计了两个问卷调查，以了解IBS-D患者的感受。IBS-SSS是临床研究中常用的问卷，用于确定IBS的严重程度。我们发现，在本研究的三种干预策略中，只有L。plantarum CCFM 8610降低了患者的总IBS-SSS评分（表2）。这些结果表明，该菌株可以减轻IBS-D的临床症状。进一步分析IBS-SSS的子评分项目发现，L。plantarum CCFM8610显著减轻腹胀症状并改善排便习惯满意度。腹胀是IBS-D的主要临床症状之一，通常与内脏高敏感性相关[33]。对于IBS-D患者，内脏高敏感性的特征是肠道疼痛感增强，这基本上是外周和中枢神经系统的疾病[34]。这种神经系统疾病降低了胃肠道刺激的阈值，因此IBS-D患者经常遭受腹痛和腹胀[33]。在动物模型中，已证明乳杆菌我们的结果与这些结论相似。因此，我们推测菌株L. plantarumCCFM 8610可能具有类似的作用，从而减轻人类IBS-D的临床症状。Y. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376384除了内脏高敏感性，IBS-D患者还具有乳糖和果糖吸收不良的典型症状，这阻止了小肠对膳食碳水化合物的充分吸收。这些未被吸收的碳水化合物被结肠微生物发酵，产生大量气体，导致严重的腹胀症状[37]。L.植物体通常在结肠中起促增殖作用。由于L.植物，饮食中未发酵的糖可以在结肠中被彻底吸收，以减少气体产生[38，39]。因此，我们认为L.植物CCFM8610还可以通过减少结肠中的气体产生来抑制腹胀症状。我们发现L. plantarum CCFM8610和安慰剂治疗可以改善患者的排便习惯满意度。然而，安慰剂的效果只出现在干预期的前四周，而L。plantarum CCFM8610在整个干预期间是一致的。在以前的研究中，L.植物CCFM8610被证明可以改善肠道水肿[40]，但没有安慰剂（如麦芽糖糊精）被报道发挥类似的作用。因此，有理由推测安慰剂组患者排便习惯满意度的改善可能是由于安慰剂效应[41]。L. plantarum CCFM 8610还显著减少了具有重度和中度IBS-D症状的患者数量，但在安慰剂组中没有观察到具有各种症状的患者数量的显著变化（表2）。采用IBS-QOL量表定量评价患者的生活质量。通过对IBS-QOL结果的分析，我们发现L。plantarum CCFM 8610显著改善了IBS-QOL总评分，减轻了对饮食和社会印象的担忧，并改善了情绪波动（表2）。有些食物会引起腹痛和腹胀，因此IBS-D患者的饮食往往有很多限制[4]。此外，IBS-D的临床症状通常导致患者避免社交活动和团体旅行，这些患者通常担心他们的社会印象[32，42]。饮食和社会活动的不便直接导致IBS-D患者明显的情绪变化。肠道和大脑可以通过肠道-大脑轴双向交流肠道刺激和不适可导致患者的情绪变化，这些情绪变化可通过迷走神经引起肠道内脏高敏感症状和肠道应激反应[44]。患者的抑郁、焦虑和焦虑等情绪变化也可能加重IBS-D症状并降低生活质量[44，45]。Liu等人[46]对焦虑和抑郁的临床试验进行的荟萃分析发现，乳酸杆菌具有缓解焦虑和抑郁的作用，而placebos和寡糖则没有。这一结果表明L.结论：CCFM 8610对IBS-D 患者的情绪有调节作用。此外，由于L.plantarum CCFM8610，腹胀症状得到缓解，对患者饮食的担忧得到改善。因此，我们认为L. plantarum CCFM 8610可减轻IBS-D患者对饮食的担忧，改善情绪波动，从而提高IBS-D患者的生活质量。肠道微生物群生态失调是IBS-D的重要特征[47]。与健康人相比，IBS-D患者肠道菌群组成发生了显著变化，肠道菌群多样性降低[48]。许多研究表明，肠道微生物群失调可能是IBS-D的原因之一[49]。为了探索益生菌对IBS-D患者肠道微生物群的影响，我们对粪便微生物群进行了测序，并在属水平上分析了各组之间的物种多样性和差异。结果表明，L. plantarum CCFM8610显著增加了肠道微生物群多样性，并作为益生菌减轻肠道微生物多样性的初步证据。生物群生态失调（Fig. 2）的情况。在进一步分析各组之间的各种属之后，我们发现在安慰剂组中，类杆菌属处于低相对丰度，而普雷沃氏菌属具有高相对丰度。低聚糖或益生菌的干预可以增加类杆菌的相对丰度，降低普雷沃菌的相对丰度。这种相对丰度的变化使IBS-D患者的肠道微生物群组成更接近健康人[50，51]。此外，除了拟杆菌和普雷沃氏菌外，我们发现各组之间甲烷短杆菌的相对丰度存在显著差异，甲烷短杆菌是一种可以利用氢气将二氧化碳还原为甲烷的厌氧细菌。由于其产气特性，甲烷短杆菌相对丰度的增加通常会导致严重的胃肠道胀气，并加剧IBS-D的临床症状[52，53]。在本研究中，L. 植物乳杆菌CCFM8610能降低甲烷短杆菌的相对丰度，这与以前的结果一致。plantarum CCFM 8610显著减轻IBS-D患者的腹胀症状。我们的结论是L. plantarum CCFM 8610通过部分减轻肠道微生物群的生态失调来减轻IBS-D临床症状。与已报道的具有IBS-D缓解作用的益生菌相比，我们发现L。plantarum CCFM8610显著增加了丁酸产生菌的相对丰度。在属的水平上，一系列产丁酸的菌种，如厌氧柄菌属、厌氧干菌属、双歧杆菌属、丁酸单胞菌属和气味杆菌属，在L. CCFM8610组患者。丁酸是一种短链脂肪酸，具有多种健康促进作用。在肠道中，丁酸可降低NF-κB的表达，抑制巨噬细胞释放TNF-α，并激活肠上皮细胞中的转录因子缺氧诱导因子（HIF）-1，从而维持肠道屏障的完整性，减轻肠道的炎症反应，缓解急性神经性疼痛和腹胀[54丁酸盐也是一种重要的组蛋白脱乙酰酶抑制剂，可促进宿主生物体中的组蛋白乙酰化，从而影响脑功能并可能抑制抑郁症[57，58]。IBS-D患者肠道中丁酸产生菌的相对丰度显著低于健康人[59]。因此，肠道中丁酸浓度的增加可能实现IBS-D临床症状和情绪的双重调节。通过肠道微生物群在肠道中发酵未消化的碳水化合物是丁酸的主要来源[60]。因此，一种可能的机制可能是口服L.植物CCFM 8610显著增加了丁酸产生属的相对丰度，其随后促进肠中丁酸的产生，从而减轻IBS-D患者的临床症状和负面情绪。 这表明L. plantarum CCFM 8610对IBS-D临床症状和生活质量的影响与丁酸产生菌相对丰度的增加有关。同时，一些研究表明，IBS-D患者的肠道微生物群多样性低与丁酸产生菌的相对丰度低有关[59]。因此，L.植物CCFM 8610可能是IBS-D患者肠道微生物群生态失调恢复的机制之一。类似的结果在以前的益生菌缓解IBS-D的研究中没有报道。这表明增加丁酸产生菌属的相对丰度可能是L. plantarum CCFM8610.我们认为这是L的一个优点。 plantarumCCFM 8610菌株对IBS-D的缓解作用。除上述结论外，L.植物CCFM8610在安全性方面也优于其他治疗方法Y. Liu，X.于湖，加-地Yu等人工程7（2021）376385对于IBS-D。IBS的治疗选择每天都在增加，但伴随着更复杂的副作用。 低发酵、低聚糖、二糖、单糖和多元醇（FODMAP）饮食仅对某些患者有用，并且可引起结肠微生物群的巨大变化[61]。化学药物如阿洛司琼和依洛沙多林可缓解腹泻，但也可引起严重的缺血性结肠炎、便秘、胰腺炎和括约肌痉挛[62，63]。一些研究支持使用心理疗法来缓解IBS，但其有效性尚未探索[4]。这些结果表明，大多数治疗IBS-D仍然有严重的缺陷。也有关于益生菌引起的不良健康状况的报道。这表明益生菌不是完全安全的膳食成分。因此，我们调查了以前关于益生菌引起的不良健康事件的文献。我们发现，大多数益生菌不良健康事件的报告发生在特定人群中，如重症监护病房患者[64]，患有免疫缺陷和营养不良的老年人[65]或结构性心脏病患者[66]。对于轻度患者，益生菌几乎不会引起任何不良健康事件。本研究的疾病模型IBS-D不引起任何器质性病变。这是一种相对温和的疾病。因此，发生不良事件的可能性较低。此外，益生菌的大多数不良健康事件都是由酵母菌引起的。很少有由乳酸菌引起的不良健康事件[67]。在乳杆菌不良事件的报道中，鼠李糖乳杆菌不良事件最为常见，可能与菌毛结构和胞外多糖成分有关[68]。目前，尚无L.植物。此外，在本研究进行之前，我们的菌株L。plantarum CCFM8610进行了几项动物实验[22，23，69]和一项临床研究[24]，没有发生不良健康事件。因此，结合本研究中未发生不良事件的结论，我们初步得出结论，L. plantarum CCFM8610是一种健康的 策略。5. 结论本研究的目的是探讨L. plantarum CCFM 8610对IBS-D症状的缓解作用。为此，我们设计了一项随机、双盲、安慰剂对照的初步临床试验。结果表明，L. plantarum CCFM 8610显著恢复了IBS-D患者的肠道微生物群组成和多样性，并减轻了IBS-D患者的临床症状和阴性情绪。我们还发现，乳plantarum CCFM 8610对肠道微生物群、IBS-D临床症状和生活质量的影响可能与产生丁酸的细菌属的相对丰度的增加有关。本研究结果验证了益生菌对IBS-D的缓解作用，为探讨益生菌缓解IBS-D症状的机制奠定了基础。确认本 工 作 得 到 了 国 家 自 然 科 学 基 金 项 目 （ 31871773 和31820103010）、国家重点研发项目（2018YFC1604206）、新疆生产建设兵团南疆重点产业创新发展支柱项目（2018DB002）、食品科学技术国家一级学科项目（JUFSTR 20180102）、生物技术与生物科学研究会（BBSRC）牛顿基金联合中心奖和江苏省食品安全与质量控制协同创新中心的支持遵守道德操守准则Yang Liu 、 Xinjie Yu 、 Leilei Yu 、 Fengwei Tian 、 JianxinZhao 、 Hao Zhang 、 Long Qian 、 Qun Wang、 Zhengqing Xue 、Qixiao Zhai和Wei Chen声明他们没有利益冲突或财务冲突需要披露。引用[1] HoltmannGJ，Ford AC，Talley NJ. 肠易激综合征的病理生理学《柳叶刀胃肠病学与肝病学》 2016;1（2）：133-46。[2] Lovell RM，Ford AC.肠易激综合征的全球患病率和危险因素：一项荟萃分析临床胃肠病学和肝脏病学2012;10（7）：712-21。[3] Shin A，Jiangsu S，Camilleri M，Xu H，Lembo A.肠易激综合征患者的信息和保健寻求行为临床胃肠病学和肝病学。在出版社。[4] LongoDL，Ford AC，Lacy BE，Talley NJ. 肠易激综合征。 新英格兰医学杂志2017;376（26）：2566-78。[5] Singh P，Staller K，Barshop K，Dai E，Newman J，Yoon S，et al.肠易激综合征 - 腹 泻 患 者 的 疾 病 特 异 性 生 活 质 量 低 于 肠 易 激 综 合 征 - 便 秘 患 者 。 World JGastroenterol 2015;21（26）：8103-9.[6] Lin S，Mooney PD，Kurien M，Aziz I，Leeds