鸡免疫刺激CpG质粒构建与滚环扩增策略

本文主要探讨了富含CpG基序的重组质粒的构建与制备技术在基础兽医学领域的应用。CpG基序，由于其在免疫调节中的关键作用，特别是在鸡等动物体内的免疫刺激效应，成为了研究热点。作者张金秋和苗晋锋通过江苏省农业科学院和南京农业大学动物医学院的研究，首先设计并合成了一段人工CpG-ODN（富含CpG的寡核苷酸）序列，将其插入到常用的pMD18-T载体中。 使用分子生物学方法，他们通过限制性内切酶处理和连接反应，实现了对原有质粒的逐步改造，成功构建出含有多个拷贝CpG基序的重组质粒。这种高拷贝的重组质粒对于后续的研究，如CpG-ODN的生物学功能研究或疫苗开发，具有重要意义，因为它可以提供大量的研究材料。 接下来，文章重点介绍了如何利用滚环扩增技术来大规模制备CpG核酸。滚环扩增是一种高效且纯化度高的DNA扩增策略，它能够确保产物的高质量。通过这种方法，研究人员可以得到高纯度和高浓度的CpG核酸，这不仅简化了大规模制备过程，也为CpG-ODN的工业化生产提供了新的可能和创新的制备途径。 总结起来，这篇文章为CpG基序在鸡免疫调控方面的应用研究提供了一个实用的工具，展示了如何通过分子生物学手段优化质粒设计和大规模制备CpG核酸，这对于推进基础兽医学领域特别是免疫学研究具有实际价值。同时，作为首发论文，这项工作还为同行学者提供了新的思考角度和技术参考。