P21对AGS胃癌细胞survivin及端粒基因表达影响研究

"p21对人胃癌细胞株 AGS的 survivin及端粒相关基因表达水平的调控" 本文探讨了P21WAF基因在人胃癌细胞株AGS中的作用，特别是它如何影响survivin基因以及端粒相关基因htert、TRF1、TRF2和hPOT1的表达水平。P21WAF基因是细胞周期调控的重要因子，具有抑制肿瘤细胞增殖的能力，而survivin基因则是一个参与抑制细胞凋亡的蛋白质。 实验方法采用了亚克隆技术，构建了pEGFP-C2-P21真核表达质粒，并通过脂质体介导和G418筛选，成功将该质粒稳定转染至AGS细胞中。荧光显微镜观察证实了P21在AGS细胞内的定位主要在细胞核。流式细胞术分析显示，转染了P21WAF基因的AGS细胞在细胞周期中被阻滞于G1/S期，表明P21WAF可能通过调控细胞周期进程来影响细胞增殖。 进一步，使用实时荧光定量PCR技术，研究人员检测了AGS细胞中P21WAF、survivin、htert、TRF1、TRF2和hPOT1基因的mRNA表达水平。结果显示，P21WAF的mRNA表达量显著增加，而survivin的mRNA表达量相对降低至仅1.6%，这暗示了P21WAF可能通过转录水平抑制survivin基因的表达。然而，对于端粒相关基因htert、TRF1、TRF2和hPOT1，其mRNA表达水平变化不大，分别为95%、97%、102%和99%，表明P21WAF可能不对这些端粒相关基因的转录产生显著调控。 P21WAF基因在AGS细胞中的高表达能够有效地改变细胞周期状态，特别是在G1/S期产生阻滞，这可能是通过抑制survivin基因表达来实现的。然而，对于htert、TRF1、TRF2和hPOT1这些端粒相关基因，P21WAF似乎并未表现出明显的转录调控作用。这一发现对理解胃癌的发生机制和潜在治疗策略有重要意义，特别是在寻找能够影响细胞周期和凋亡过程的新靶点方面。