蒙彼利埃大学与CNRS联合开发细胞内穿透载体用于靶向catphepsin D抑制剂

由蒙彼利埃大学提供用于靶向catphepsin D抑制剂的细胞内穿透载体的开发在和CNRS研究单位- UMR 5247（马克斯·穆塞隆生物分子研究专长：分子工程由Clément Sanchez提供于2016年5月26日在评审团面前进行了辩护让·吉隆波尔多大学ARNA实验室CNRS- INSERM教授报告员塞巴斯蒂安·帕波特教授，CNRS-普瓦捷大学普瓦捷介质和材料化学研究所报告员帕斯卡尔·拉斯特洛教授，CNRS-审查员让·马丁内斯蒙彼利埃大学Max Mousseron生物分子研究所CNRS教授审查员文森特·利索夫斯基蒙彼利埃大学Max Mousseron生物分子研究所CNRS教授论文主任让-弗朗索瓦·赫尔南德斯CNRS研究总监-蒙彼利埃大学Max Mousseron生物分子研究论文共同主任由蒙彼利埃大学提供用于靶向catphepsin D抑制剂的细胞内穿透载体的开发在和CNRS研究单位- UMR 5247（马克斯·穆塞隆生物分子研究专长：分子工程由Clément Sanchez提供于2016年5月26日在评审团面前进行了辩护让·吉隆波尔多大学ARNA实验室CNRS- INSERM教授报告员塞巴斯蒂安·帕波特教授，CNRS-普瓦捷大学普瓦捷介质和材料化学研究所报告员帕斯卡尔·拉斯特洛教授，CNRS-审查员让·马丁内斯蒙彼利埃大学Max Mousseron生物分子研究所CNRS教授审查员文森特·利索夫斯基蒙彼利埃大学Max Mousseron生物分子研究所CNRS教授论文主任让-弗朗索瓦·赫尔南德斯CNRS研究总监-蒙彼利埃大学Max Mousseron生物分子研究论文共同主任致我死去的塔塔·卡门致我的父母一个法迪致我的兄弟让-巴蒂斯特西蒙和安托万-加布里埃尔给爷爷奶奶的在Magali Postollec献给我不认识的祖父安托万·桑切斯谢谢你3谢谢你在这里，我结束了首先，我想非常真诚地感谢让·马丁内斯教授接受我进入他的研究所，以便进行我在当然，我要感谢Pascal Rathelot教授和Jean Guillon教授同意来评判我的作品。我要特别感谢塞巴斯蒂安·帕波特教授，他不仅来评判我的作品，而且我还要感谢朗格多克-鲁西永地区和我不能不花时间适当地感谢我的两位论文导师，文森特·利索夫斯基教授和让-弗朗索瓦·埃尔南德斯博士，感谢他们，我今天来到这里。这些年来，他们总是支持和鼓励我，在我需要的时候出现，总是再次感谢你。我要热烈感谢非常感谢我在论文期间与之共事的整个在很长一段时间里，我会记得在实验室里和他们中的一些人一起玩的游戏之夜，也会记得IBMM之间的petanque比赛!4我 想 感 谢 皮 埃 尔 · 桑 切 斯 ， 因 为 J’en profite pour remercier iciAurélien Lebrun et Karine Parra de l'UM2 pour les analyses structurales(RMN), ainsi que Guillaume Cazals pour les analyses非常感谢Elodie Mauchauffée和Loïc Mathieu ，他们现在都是医生，欢迎 谢谢你Elo让我发现了一种新的头发心态：夹克! 但我和你在一起最美好的回忆肯定是我们参加的一个优秀的德国乐队的那场令人惊叹的音乐会他们离开后，办公室被我的新朋友"室友" Clément Bonnel和Thibault Tintillier，我想感谢他们每天的支持。谢谢你克莱姆让我的电影订阅物有所值! 也感谢你的这几个时期，我们知道我们不会因为来工作而挨饿（饼干，蛋糕，巧克力...）。LaurentGavara博士从来没有忽视过这一点，他很清楚这间办公室里有一条鲸鱼，经常来拜访我们! 非常感谢他，感谢他的幽默，但最重要的是感谢他的支持和我还要感谢Cindy Patinote，她在我成为她的皇室成员后一直在我身边，感谢你们美味的糕点。但我还在等我的圆形棋盘蛋糕! 当然，我要感谢我遇到的其他博士生和博士后当然，如果没有一个人在更私人的环境中支持我，这些年就不会如此平静地过去。这就是为什么我要感谢法迪·巴德尔，我的生活伴侣，他一直支持我，无论是好日子还是坏日子。我知道是他每天坚定不移的支持和精力让我走到了今天，还有他的背包客和他的好车! 你从普瓦捷跟着我到这里，然后你走了很远的路。但它又开始了一次新的冒险，我希望我们不会在1200公里之外，所以在英国会合？谢谢你5在这三年里，我能够指导来自制药学院、学士学位或德国的实习生：艾玛·古特克内希特、桑迪·普劳德、文森特·让-皮埃尔、科拉莉·苏德雷和莉娜·桑格曼。我想感谢他们所有人的工作、良好的幽默感和投资。我感谢我的朋友们，即使距离意味着我们很少见面，你们仍然是我生命中重要的一部分。感谢我的小Mika，她留在普瓦捷，把催化作为她的论文题目;感谢Juju，她搬到了北方的敦刻尔克，也成为了一名医生;感谢Marion，她总是很高兴（我把电梯还给你!）在里尔;我的弗洛茅斯和梅勒妮，他们正在前往普瓦捷的路上;马努埃，我们已经认识20年了;乔，从她的世界之旅回来;和亚历山大，我的替身，我们是"不可分割的"在高中根据老师...一个巨大的感谢你们所有人在那里。最后，如果没有我所爱的人的存在，这一切都不会发生：我的父母;我的兄弟让-巴蒂斯特、西蒙和安托万-加布里埃尔;塔蒂·克洛克洛（我想我的耳朵会暖和起来的）;还有我的嫂子、侄子和侄女，由于距离遥远，我在这三年里非常想念他们，我深深感谢他们的支持和爱。谢谢妈妈在过去的一年里来看我几个星期，谢谢爸爸总是我可以依靠的坚实的岩石，谢谢大家听我亲切地谈论我所做的一切。虽然这个领域对你来说仍然有些模糊。6缩写7缩写ADC：抗体药物偶联DNA：脱氧核糖核酸AMBA：2-（氨基甲基）苯甲酸AMCA：2-（1-（氨基甲基）环己基）乙酸AMIA：2-（2-（氨基甲基）-1H-吲哚-1-基）乙酸AMPA：2-（2-（氨基甲基）苯教）乙酸AMPyrA：2-（2-（氨基甲基）-1H-视黄醇-1-基）乙酸apoE：载脂蛋白EAPP：淀粉样蛋白前体蛋白RNA：核糖核酸ATP：三磷酸BMP：（苯并三唑-1-羟基）三（二甲基氨基）-膦酸六氟磷酸盐Br-AMPA：2-（2-（氨基甲基）-4-溴苯酚）乙酸BVZ：贝伐珠单抗CathD：组织蛋白酶DCBN：非小细胞肺癌CF：羧荧光素ChaSta：环己基丙氨酸他汀CN2/CN 3：阴性对照2 /3 CPNP：细胞渗透非肽CPP：细胞渗透肽D/LBT：D/L苯并噻嗪DCM：二氯甲烷DEA：二甲基胺二异丙基乙基胺二MeO-AMPA：2-（2-（氨基甲基）-4，5-二房舍）乙酸8diOH-AMPA：2-（2-（氨基甲基）-4，5-二羟基苯酚）乙酸DBT：（S）-2-（3-氨基-4-氧代-3，4-二氢苯并[b][1，4]噻嗪-5（2 H）-基）乙酸DMF：二甲基甲酰胺DMSO：二甲基硫氧化物dMMP：脱氧胸苷单磷酸dUMP：脱氧尿苷单磷酸EDT：1，2-乙二巯基等式：等效FDA：食品药品监督管理局FGF2：成纤维细胞生长因子2FH4：四氢叶酸FI：氟树脂Fitc：荧光素琼脂异硫氰酸酯：糖胺聚糖HBTU：N-[（1H-苯并三唑-1-基）（二甲基氨基）亚甲基]-N-甲基甲基铵N-氧化物HCT116：结肠HER 1/2：人表皮生长因子受体Hm：亲水性半HMBC：异核多键相关HPLC：高效液相色谱HRMS：高分辨率质谱IC50：导致50%抑制IGF1的抑制剂浓度：胰岛素生长因子1白细胞介素6IVa：异戊酸LBD：（S）-2-（3-氨基-2-氧代-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b][1，4]二氮杂卓-1-基）乙酸LC-MS：液相色谱-质谱联用缩写9LiHMDS：双（三甲基甲硅烷基）酰胺锂LNCaP：前列m/p-AMPA：间位对氨基甲基苯乙酸M6 P：甘露糖-6-磷酸丝裂原活化蛋白激酶MCF7：乳腺MDA-MB 231：MEC乳腺癌细胞系：细胞外mTOR：雷帕霉素MTX的哺乳动物靶点：甲氨蝶呤NLS：核定位序列：N-甲基-2-热解烷酮PDT：PLGF光动力疗法：胎盘生长因子PPA：聚磷酸NMR：核磁共振SaOS：骨肉瘤SG细胞系SNAr：芳香亲核取代SPPS：固态肽合成SSP：无进展Sta：他汀类药物TA：环境温度TFA：三氟乙酸：四氢呋喃TNBS：2，4，6-三硝基苯磺酸拓扑I/II：I/IIVEGF：血管内皮生长因子10摘要11摘要3.第三次专利申请7摘要11第16章章第一次见面导言21第二十三章复活节...................................................................................................................................................................................第一章：书目部分27I)癌症：数字，定义，致癌作用29a.癌症流行病学29b.癌症的定义30c.致癌性33II)主要抗癌治疗及其靶点37a.手术37b.放射治疗38c.免疫治疗39d.化疗31i.拓扑异构酶I的抑制剂....................................................................................................................................... 41ii.拓扑异构酶II抑制剂 43iii.烷基化剂45iv.抗代谢药物46v.有丝分裂纺锤体的毒性48vi.铂盐49vii.蛋白酶体50抑制剂e.抗体-药物偶联物51f.血管生成抑制剂53种...........................................................................................................................i.VEGF 54的抑制剂ii.RGD56肽iii.抑制....................................................................................................................................................................g.蛋白激酶抑制剂59h.L’hormonothérapiei.光动力疗法（PDT）64j.基因疗法67III)L-α-catephesin D作为治疗靶点69a.结构69b.角色72.12i.在健康细胞中72ii.病理学73c.组织蛋白酶D 77的抑制剂IV)用于释放细胞膜的载体87a.细胞膜87b.CPP 94i.一点....................................................................................................................................................................ii.结构和分类961.阳离子CPP 962.两亲性CPP 973.疏水性CPP 101iii.内化机制..........................................................................................................................................................1.L’endocytose2.直接跨质粒易位105iv.癌症治疗中的CPP107v.结论111V)前一次罢工113a.DBT 113i.合成114ii.蜂窝渗透测试116b.L’AMPAi.合成119I.生物学测试...................................................................................................................................................... 120第二章：新型细胞穿透载体的开发和JMV4463结合物的第125章介绍............................................................................................................................................................................................I)新载体的前体平台的合成128a.碧玺128系列AMPA类似物的合成.....................................................................................................b.吲哚147系列AMPA类似物的合成c.取代的AMPA衍生物的合成...............................................................................................................i.4-位单甲氧基衍生物的合成ii.3，4位二甲氧基化和4位溴化衍生物d.AMPA 159的其他衍生物....................................................................................................................e.苯二氮卓类DBT衍生物（LBD）160f.结论164II)内塞·佩蒂德164a.合成的类型165b.合成感（SPPS）168c.合成策略和保护性分组169摘要13d.树脂170e.偶联剂172i.碳二酰胺172ii.膦酸盐175iii.铀/铵177盐.............................................................................................................................................................f.肽179的裂解和纯化g.支持物上肽合成的监测180i.颜色测试180ii.FMOC 181的剂量III)JMV4463类似物共轭物的研究182a.共轭物的合成183b.生物学试验188c.结构-活性关系的研究190i.向量的修改190ii.他汀类药物193的改良I.修改JMV4463 197的三个组成部分的.......................................................................................................... 布局IV)JMV4463的现场研究199a.肿瘤体积的变化199b.治疗对200只小鼠C结论和展望203第207章第一次见面I)E-............................................................................................................................................................................................ 209系列a.NMR 209。b.分析液相色谱209c.高效液相色谱制备液210d.LC-MS 210e.LC-MS制备液210f.自动快速色谱211II)安帕河上的辛塞塞在211号金字塔系列中................................................................................................................................a.2-（1H-视黄醇-1-基）丙酸苯甲酯的合成6 211b.2-（2-甲酰-1H-视黄醇-1-基）丙酸苯甲酯的合成5 212c.2-（3-甲酰-1H-视黄醇-1-基）丙酸苯甲酯的合成10 213d.2-（2-（（羟基亚氨基）甲基）-1H-视黄醇-1-基）丙酸苯甲酯的合成12，214e.2-（1H-资历-1-基）丙酸叔丁基酯的合成16，214f.2-（2-甲酰-1H-视黄醇-1-基）丙酸叔丁基酯的合成17 215g.17-............................................................................ 216-（3-甲酰-1H-视黄醇-1-基）丙酸叔丁基酯h.2-（2-（（羟基亚氨基）甲基）-1H-视黄醇-1-基）丙酸叔丁基酯的合成18 21614i.2-（2-甲酰-1H-视黄醇-1-基）乙酸叔丁基酯的合成22 217j.2-（2-（（羟基亚氨基）甲基）-1H-视黄醇-1-基）乙酸叔丁基酯的合成23 218a.2-（2-（氨基甲基）-1H-视黄醇-1-基）乙酸叔丁基酯的合成24 219b.合成2-（2-（9 H-氟-9-基）甲氧基）羧酸基）氨基）甲基）-1H-视黄醇-1-基）乙酸叔丁基酯25219c.1H-热解-2-甲醛辛27，220d.（1H-吡罗-2-基）甲胺氯化物28，221e.（9 H-氟-9-基）甲基（（1H-视黄醇-2-基）甲基）氨基甲酸酯的合成26，222f.2-（1H-视黄醇-1-基）乙酸苯甲酯的合成82 223g.2-（2-甲酰-1H-视黄醇-1-基）乙酸苯甲酯的合成29，223h.2-（2-（（羟基亚氨基）甲基）-1H-视黄醇-1-基）乙酸苄酯的合成30 224i.（1-（羧甲基）-1H-视黄醇-2-基）甲胺氯化物的合成31 225j.2-（2-（9 H-氟-9-基）甲氧基）羧酸基）氨基）甲基）-1H-资历-1-基）乙酸的合成................k.2-（2-（己酰胺甲基）-1H-视黄醇-1-基）乙酸叔丁基酯的合成34 227III)印度系列227中的安帕漂流者.................................................................................................................................................a.1H-吲哚-2-甲酰胺的合成43 227b.（1H-吲哚-2-基）甲烷胺的合成42 228c.（（1H-吲哚-2-基）甲基）氨基甲酸叔丁基酯的合成45 229d.2-（2-（叔丁氧羧）氨基）甲基）-1H-吲哚-1-基）乙酸叔丁基酯的合成46 230e.（（1H-吲哚-2-基）甲基）（9 H-氟-9-基）甲基氨基甲酸酯的合成47 231f.（（1H-吲哚-2-基）甲基）氨基甲酸苯甲酯的合成49 232g.2-（2-（苯甲氧）羧酸）氨基）甲基）-1H-吲哚-1-基）乙酸甲酯的合成50 233h.2-（2-（苯甲氧）羧酸基）氨基）甲基）-1H-吲哚-1-基）乙酸的合成i.2-（2-（苯甲氧）羧酸基）氨基）甲基）-1H-吲哚-1-基）乙酸苯甲酰的合成52，235j.2-（2-（氨基甲基）-1H-吲哚-1-基）乙酸的合成k.2-（2-（9 H-氟-9-基）甲氧基）羧酸基）氨基）甲基）-1H-吲哚-1-基）乙酸的合成................IV)AMPA子公司的服务.............................................................................................................................................................a.合成2-（2-溴-4-甲氧基苯酚）乙酸甲酯56 239b.7-溴-1，2-二氢异奎宁-3（4 H）-酮的合成59，240c.2-（2-（氨基甲基）-4-溴苯酚）乙酸盐酸盐的合成d.2-（2-（9 H-氟-9-基）甲基）氨基）甲基）4-溴苯酚）乙酸的合成62 . 242个e.1，1-二甲基-1，2-二氢异奎宁-3（4 H）-酮的合成64，243f.2-（2-（氨甲基）-4，5-二甲氧基苯教）乙酸盐酸盐的合成g.2-（2-（9 H-氟-9-基）甲氧基）羧酸基）氨基）甲基）-4，5-二房舍基）乙酸的合成.............h.2-（2-（9 H-氟-9-基）甲氧基）羧酸基）氨基）甲基）-4，5-二羟基苯酚）乙酸的合成.........i.2-（1-（9 H-氟烯9-基）甲氧基）羧酸基）氨基）甲基）环己基）乙酸的合成