家蚕BmMP54基因融合多角体基因：表达、功能及组织分布研究

本研究论文深入探讨了家蚕BmMP54基因与多角体基因(polyhedrin, Polh)融合表达及其功能的初步研究。研究人员通过从浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所构建的家蚕蛹cDNA文库中筛选出一个312bp的阅读框，编码103个氨基酸残基的未知序列。经NCBI同源性比对，确认这是家蚕的一种新基因，并因其包含两个跨膜区域，命名为BmMP54。 融合基因的构建是研究的核心，BmMP54基因与多角体基因结合，分别被克隆到原核表达载体pGEX-4T-1和家蚕杆状病毒表达载体pFastBacHTB中，使得融合蛋白可以在大肠杆菌BL21(DE3)和家蚕细胞中得到表达。值得注意的是，融合蛋白以包涵体形式存在，通过调节pH值的方式进行初步纯化，随后通过阴离子交换层析进行进一步提纯。 实验结果显示，BmMP54在不同龄期的家蚕幼虫组织中表达量有显著差异，气门和脂肪体组织的表达量较高，而表皮和头部较低。通过RNAi实验，研究者发现BmMP54基因沉默会导致细胞凋亡率增加，且细胞周期进程加速，特别是BmN细胞进入S期和G2期的速度加快。这一发现暗示BmMP54可能在调控细胞通过生长阶段的检验点中扮演关键角色，阻碍细胞过快地通过这些检查点。 本研究不仅揭示了BmMP54基因的潜在功能，还为进一步探究家蚕生长发育过程中的生物学作用提供了重要的理论依据。家蚕作为生物反应器的潜力也得到了强化，特别是在蛋白质药物生产领域。关键词包括家蚕、BmMP54、跨膜蛋白、荧光定量PCR和RNA干扰，这些都显示出研究的前沿性和实用性。通过这个研究，科学家们有望为家蚕基因工程和生物技术的发展打开新的研究方向。