调节性T细胞及其在抗肿瘤免疫治疗中的临床应用

工程5（2019）132免疫学研究综述调节性T细胞及其在抗肿瘤免疫治疗中的临床应用谢峰a，b，梁瑞a，b，李丹a，b，李俊，李斌a，b，李俊a上海交通大学医学院上海免疫研究所，上海200025，中国b上海交通大学医学院免疫学与微生物学系，上海200025阿提奇莱因福奥文章历史：2018年7月23日收到2018年11月8日修订2018年12月7日接受在线发售2018年关键词：调节性T细胞肿瘤免疫治疗A B S T R A C T癌症是一种潜在的危及生命的疾病，其特征在于肿瘤细胞在宿主中的永生化免疫治疗由于其在预防肿瘤进展和转移方面的巨大潜力，最近引起了研究人员越来越多的兴趣。调节性T细胞（Regulatory T cells，TCRs）是一组抑制性CD4+ T细胞，在维持宿主免疫稳态中起重要作用。Treg缺陷可诱发严重的自身免疫性、超敏性和自身炎性病症以及其他疾病。Tcl 3通常在肿瘤微环境中富集，并且更大数量的免疫抑制性Tcl 3通常指示更差的预后;因此，对Tcl 3的功能及其在抗肿瘤免疫治疗中的临床应用重新产生了兴趣。集中于TdR消耗的累积策略似乎在抗肿瘤免疫中是有效的。预期Treg靶向策略将提供与其他治疗剂（例如，基于嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）的细胞疗法或免疫检查点阻断）。©2019 The Bottoms.Elsevier LTD代表中国工程院出版，高等教育出版社有限公司。这是一篇CC BY-NC-ND许可下的开放获取文章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。1. 介绍癌症是一个全球性的公共卫生问题，每年导致数万人死亡尽管作出了巨大努力来制定有效的治疗策略，但尚未出现令人满意的结果，大多数癌症的总体生存率和无病生存率仍然很低。尽管常规治疗，包括放疗、化疗、外科手术和分子靶向治疗，在攻击肿瘤细胞方面是有效的，但它们同时产生危及生命的副作用。最常见的不良反应包括胃肠道反应和骨髓抑制，不仅影响术后生活质量，还可直接导致死亡[1]。在过去的几十年中，免疫治疗一直是肿瘤治疗研究的一个活跃领域，并且在该领域已经花费了相当大的努力。这些以免疫检查点抑制剂为代表的新策略程序性死亡1（PD-1）、程序性死亡配体1（PD-L1）和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4））和嵌合抗原*通讯作者。电子邮件地址：danli@shsmu.edu.cn（D. Li），binli@shsmu.edu.cn（B. Li）。受体T细胞（CAR-T）免疫疗法在解决各种类型的癌症方面显示出令人鼓舞的功效[2不幸的是，越来越多的研究表明，只有20%一种已被接受的解释是，肿瘤已经进化出一种免疫抑制网络，以防止免疫系统的攻击调节性T细胞（Tcells）是这个网络的重要组成部分强烈表达CD 25（白细胞介素（IL）-2受体α-链）和叉头盒P3（FOXP 3）的T细胞在肿瘤微环境中富集，主要包括免疫抑制网络[10]。在这里，我们重点关注TdR在肿瘤免疫抑制网络中发挥的关键作用，以及它们治疗不同类型肿瘤的治疗潜力。2. Treg分化和发育根据它们的起源，可以将它们分为两个种群。第一类T细胞是天然调节性T细胞（nTclad），其从胸腺分化并由广谱自身抗原诱导[11];因此，nTclad也被称为胸腺源性T细胞（tTclad）。后https://doi.org/10.1016/j.eng.2018.12.0022095-8099/©2019 THE COMEORS.由爱思唯尔有限公司代表中国工程院和高等教育出版社有限公司出版。这是一篇基于CC BY-NC-ND许可证的开放获取文章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。目录可在ScienceDirect工程杂志主页：www.elsevier.com/locate/engF. Xie等人/工程5（2019）132133在主要组织相容性复合物（MHC）-另一类Treg包括诱导的调节性T细胞（iT细胞），其也称为外周来源的T细胞（pT细胞）。许多因素（例如，转化生长因子b（TGF-β）、表达吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）或视黄酸的树突状细胞（DC）可以将外周CD 4+初始T细胞转化为iTcl 3[13两个亚群具有相似的表面标志物和对效应T细胞（Tefs）的相当大的抑制功能。然而，越来越多的证据表明，Treg亚群之间存在许多差异，如不同的蛋白表达和表观遗传修饰。例如，据报道，iTclad表达低水平的Helios和神经纤毛蛋白-1（NRP1），而nTclad在这些分子中是丰富的[16，17]。此外，还有另外两种不表达Foxp 3的特殊TcB亚群：产生IL-10的1型调节性T细胞（Tr1）和产生TGF-β的3型辅助性T细胞（Th 3）[18]。在Treg发育的过程中，T细胞受体（TCR）信号转导通路被阻断。是必不可少的，这样TCR的阻断导致抑制Treg发育[19]。对自身抗原具有高亲和力的T细胞在胸腺中经历负选择，导致细胞凋亡，而对自身抗原具有低亲和力的T细胞存活并发育成Teff。被选择产生nT抗体的亲合力阈值介于阳性选择和阴性选择之间[20]。此外，Treg的发育需要共刺激分子，如CD28和糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体（TNFR）相关蛋白（GITR）。先前的研究表明，在缺乏CD 28或CD 80/CD 86的小鼠中，Treg数量减少[21，22]。Treg发育的另一个不可或缺的因素是IL-2。T细胞对高剂量IL-2、固体包被或可溶性抗CD 3单克隆抗体（mAb）或抗CD 3 mAb和抗CD 28 mAb的组合仍无应答。只有当TCR信号和高浓度的外源性IL-2同时存在时，Treg才能被激活;然而，增殖比CD 4+ CD 25事实上，存在一个负环，其中抗原活化的T细胞产生IL-2以诱导TcR增殖，然后TcR产生一个超增殖因子。这些活化的T细胞的压力反应，以避免过度反应。TCR/CD 28下游的核因子-jB（NF-jB）信号通路在Treg发育中也起关键作用。在TCR/CD28共刺激条件下，C-REL与启动子结合并保留Foxp 3基因的非编码DNA序列，以调节Foxp 3转录[24]。胸腺髓质上皮细胞（mTEC）信号传导也是调节nTHBE发展的重要因素。TNFR相关因子6（TRAF6）的缺乏损害mTEC的成熟，从而抑制Treg发育[25]。在小鼠癌症模型中，研究人员发现NRP1在维持肿瘤浸润性T细胞的功能方面起着至关重要的作用。在小鼠中选择性敲除Nrp1导致TcR功能丧失。这种表型的潜在机制是由于Nrp 1缺陷而产生的干扰素-c（IFN-c）驱动肿瘤浸润性TcB的脆性[26]。在这方面，值得注意的是，缺乏Nrp 1只会影响Treg的抗肿瘤功能;它在避免自身免疫性疾病中的作用不受影响。3. Treg功能调节FOXP3是甲状腺发育和功能的主要调节因子[27]。FOXP3的重要性通过在Foxp3敲除小鼠中发现的nT细胞的缺失此外，Foxp 3的过继转移可以将外周血CD 4+ CD 25这两个发现都表明Foxp3是一个必要条件，Treg发育。Foxp3的表达受一系列生理信号和蛋白质修饰的调控。然而，除了TCF3，还有多种表达Foxp3但缺乏抑制功能的细胞类型，包括乳腺、肺和前列腺的上皮细胞[28]。这表明Foxp3的表达不足以建立Treg细胞谱系。此外，在某些情况下，FOXP 3越来越多的证据表明，Treg发育过程中存在两个独立的事件：Foxp3的表达和Foxp3的修饰[30]。3.1. Foxp3在转录水平的调控Foxp 3基因表达由四个元件控制：启动子区;第一内含子内的两个保守非编码序列（CNS 1和CNS 2）;第二内含子，包含CNS 3 [31]。CNS 1含有激活蛋白1（AP-1）、针对十肢瘫痪同源物3（SMAD 3）的母体和活化T细胞的核因子（NFAT）的结合位点。在CNS 1基因敲除小鼠中，Foxp 3在tTHBG中的表达与野生型（WT）小鼠相当，而iTreg减少;这一发现揭示了CNS 1在THBG外周诱导中的作用。CsA（NFAT抑制剂）和SIS3（SMAD3抑制剂）可导致Foxp3表达丧失[32]。CNS2含有STAT 5 [33]、环腺苷酸（cAMP）反应元件结合（CREB）/转录激活因子（ATF）[34]、叉头盒蛋白O 1（FOXO 1）和叉头盒蛋白O3（FOXO 3）[35]的结合位点，被称为“Treg特异性去甲基化区”（TSDR），因为nTcR中的该区域完全去甲基化。CNS2缺陷型小鼠在6个月后表现出TcP数量减少，表明CNS2在维持稳定性方面是必不可少的，但在Foxp3的表达方面是不稳定的[32]。CNS 3与C-REL结合，C-REL作为染色质开放剂促进Foxp 3特异性增强体的形成;在CNS 3-/-小鼠中，TcR的数量减少[24]。3.2. Foxp3基因在大肠杆菌中的后修饰Foxp 3的翻译后修饰包括泛素化、乙酰化、甲基化、聚（ADP-核糖基）化等。在促炎细胞因子和脂多糖引起的炎症下，Teff将下调Foxp3的表达，从而允许获得Tef样功能[36]。这种表型的机制如下：在炎症过程中，E3泛素连接酶Stub 1被激活，并以Hsp 70依赖性方式诱导FOXP 3降解。相比之下，泛素特异性蛋白酶7（USP 7）和泛素特异性蛋白酶21（USP 21）是两种主要的去泛素酶，其能够减少TcB的数量和功能[37，38]。赖氨酸乙酰化和脱乙酰化之间的平衡是在调节FOXP3蛋白的稳定性和 功 能 中 起重 要 作 用 的 另 一 个 因 素组 蛋 白 乙 酰 转 移 酶 （HAT ）TIP60[39]和p300[40]可以稳定FOXP3蛋白，从而通过FOXP3乙酰化促进其抑制功能在这里，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）依赖性脱乙酰酶sirtuin-1（SIRT 1）具有与TIP 60和p300相反的作用[41]。与常规T细胞相比，CNS 2和Foxp3启动子含有高度去甲基化的区域，其在维持Foxp3表达的稳定性中是不可或缺的[42]。第一内含子CREB/ATF位点的甲基化与Foxp 3表达呈负还有许多其他的调节方法，如磷酸化和小泛素样修饰物（SUMO）修饰。这是一个复杂的过程，受多种因素的调控。134F. Xie等人/工程5（2019）1324. Treg功能和抑制机制4.1. 甲状腺激素的抑制机制有多种不同的机制，通过这些机制，甲状腺激素发挥其抑制活性（图。 1）。其中，一些拟议的机制列示如下。4.1.1. 甲状腺激素分泌TGF 3可以分泌多种抑制性细胞因子，如IL-10、TGF-β[43]和IL-35[44]。目前，IL-10和TGF-β可能参与TGF-a的调节作用的观点仍存在争议. IL-10和TGF-β可以缓解Treg缺乏引起的肠道炎症[45]。然而，IL-10和TGF-β在体外的中和作用并不损害TGFAP的抑制作用[46]。Collison等人[44]已经证明，Teffs和Teffs的共培养导致由EB病毒诱导基因3（EBI 3）和IL-12 A组成的IL-35的上调，并且IL-35的异位表达可以抑制Teffs的功能。现已充分证实IL-35有助于消除炎症性肠病和银屑病[47]。IL-35的中和可限制多种人类癌症鼠模型中的肿瘤生长[48]。此外，Treg可通过分泌颗粒酶B（GZ-B）而具有免疫抑制作用。GZ-B是一种丝氨酸蛋白酶，能够诱导靶细胞凋亡[49]。与WT小鼠相比，源自GZ-B-/-小鼠的TcR具有较低的抑制能力[50]。4.1.2. 细胞间直接接触TGFP还可以通过TGF-β、CTLA-4、GITR和半乳糖凝集素-1通过细胞之间的直接接触发挥作用CTLA-4是一种由T细胞和T细胞表达的共抑制分子。Tefs的激活需要由CD 28和CD 80/CD 86的组合提供的共刺激信号。CTLA-4的亲和力高于CD 28，因此抑制了CD 28与CD 80/CD 86的结合[51GITR是在CD4 + CD25 + T细胞中组成型过表达的共刺激分子。GITR敲除小鼠显示Treg功能受损[54]。半乳糖凝集素-1属于β-半乳糖苷结合蛋白家族，是调节细胞增殖的负性生长因子半乳糖凝集素-1（Galectin-1）分泌于Teffs表面，与Teffs相互作用，破坏其细胞周期进程，从而诱导其凋亡。半乳糖凝集素-1的阻断降低了人和小鼠中Tglutamine的功效[55]。4.1.3. 细胞外三磷酸受损细胞产生的细胞外三磷酸腺苷（ATP）在炎症反应中充当“天然佐剂”。胞外酶CD39和CD73可以将ATP降解为腺苷一磷酸（AMP）并产生腺苷（Teff活化的抑制剂）[56，57]。4.1.4. T细胞与常规T细胞之间的竞争IL-2是Teff和Teff两者所需的生长因子。由于关键转录因子FOXP 3的表达，TNF-α本身不能产生IL-2，FOXP 3是TNF-α的转录抑制因子。Fig. 1.抑制机制的THEORY。GITRL：GITR配体; LAG3：淋巴细胞活化基因3蛋白; GZ-B：颗粒酶B; TIGIT：T细胞免疫球蛋白（Ig）和基于免疫受体酪氨酸的抑制基序（ITIM）结构域。F. Xie等人/工程5（2019）132135IL-2基因。因此，Treg和常规T细胞之间的竞争是Treg抑制功效的潜在机制之一[58]。4.1.5. 树突状细胞DC是负责向T细胞呈递抗原的TCL4可以通过淋巴细胞活化基因3蛋白（LAG3）[59]、T细胞免疫球蛋白（Ig）和基于免疫受体酪氨酸的抑制基序（ITIM）结构域（TIGIT）[60]和NRP1[61]与DC相互作用，以诱导免疫抑制性IDO的产生[62]。IDO降解色氨酸并导致T细胞凋亡。4.1.6. 氧化应激肿瘤中的甲状腺素在氧化应激下死亡。值得注意的是，凋亡的TGFs仍然具有免疫抑制性，这对靶向TGFs的抗肿瘤免疫治疗提出了挑战。其机制可能是由于释放大量的小代谢物（如ATP）。一般来说，ATP对宿主是有帮助的;然而，猝死状态下的T细胞迅速将ATP转化为腺苷，然后与T细胞表面的受体结合并影响T细胞功能[63]。4.2. Treg在肿瘤最著名的功能是抑制。 也就是说，在受TCR信号刺激后，TcR具有抑制多种细胞（包括Teff、B细胞、自然杀伤（NK）细胞和DC）的活化和增殖的能力。此外，THBE的免疫抑制作用不是抗原特异性的，并且不受MHC的限制。大量研究表明，TGFAP参与机体的稳态调节和肿瘤免疫逃逸.来自小鼠和人类的多项研究的压倒性证据表明，过继性Treg转移可以逆转由Treg缺陷或Foxp 3突变诱导的自身免疫性疾病[64因此，TdR在保护宿主免受失调方面是必需的和不可缺少的在肿瘤中，人们已经认识到，大量存在的TdR通常表明预后不良[67]。为了确定肿瘤免疫和自身免疫之间的共同基础，Shimizu等人[10]证明，通过抗CD25抗体去除Tlymphocyte可以有效缓解各种接种的同源肿瘤。然而，最近的新研究对TdR与肿瘤预后的关系提出了挑战。研究人员发现，基于Foxp 3和CD 45 RA的表达，TcB可分为三种类型：初始TcB（FOXP 3 lo CD 45 RA+）、效应TcB（FOXP 3 hi CD 45 RA-）和非TcB（FOXP 3 lo CD 45 RA-）。天然TcR仅具有弱抑制性，而效应TcR在抗原刺激后从天然TcR分化，具有强抑制活性和稳定功能。Non-Teptide不能发挥抑制作用，但可以分泌促炎细胞因子。基于这种分类，结直肠癌（CRC）已被分成两种类型，其中一种主要由效应Tcl3浸润，而另一种则富含非Tcl3。在前一组中，Treg表明预后不良;然而，在后一组中，肿瘤微环境中Treg浸润较多的患者预后较好[68，69]。事实上，甲状腺肿的出现并不总是有害的。强证据支持慢性炎性疾病促进某些类型的癌症如结肠癌、肝癌和胰腺癌的进展的观点。因此，靶向肿瘤环境的炎症网络的方法可能能够提供肿瘤预防和治疗[70]。 睾酮是主要的抗炎因子之一。流行病学数据显示，暴露于不同环境生物的个体保持保护性Treg表型，然而，由于调节不良的Treg反馈回路，在生命早期接触很少的卫生个体在生命后期遭受恶性肿瘤的风险增加[71]。此外，越来越多的研究揭示了FOXP3+ TcR的其他独特功能。其中一个功能是通过过氧化物酶体增殖物激活受体-c（PPAR-c）和IL-33抑制致通过分泌的细胞因子双调蛋白（Areg）[74，75]或刺激干细胞的分化[76]。这些发现提供了新的可能性，即肿瘤相关的TdR的作用可能是多种多样的;关注这些额外功能的新研究可能揭示抗肿瘤临床研究的治疗靶点。5. 免疫细胞与肿瘤微环境肿瘤细胞的突出特征之一是其无限增殖能力，这导致大量的能量需求。细胞获得ATP的主要途径有两一个是细胞质中葡萄糖的糖酵解（Gly），另一个是线粒体中糖苷通过三羧酸（TCA）循环的氧化磷酸化。肿瘤细胞优先选择糖酵解途径以获得ATP和其他形式的能量，即使在有氧环境中也是如此，这被称为Warburg效应[77]。通过糖酵解途径，肿瘤细胞产生大量代谢产物，如乳酸和二氧化碳。这些产物不仅抑制常规T细胞的作用，而且抑制DC的成熟和活化。原因是抗肿瘤免疫细胞（如溶细胞性T淋巴细胞（CTL）、Tefs和活化的DC）与肿瘤细胞一样，通过需氧Gly和谷氨酰胺分解途径获得能量和生物合成所需的原料[78]。然而，Tendon更喜欢脂肪酸能量供应途径，并可以利用肿瘤的代谢产物来获得能量[79]。因此，肿瘤细胞在免疫抑制网络中增殖，其中T细胞是丰富的，但T细胞和DC失去其功能。Chang等人[80]已经发现肿瘤细胞和T细胞代谢肿瘤微环境中的葡萄糖可以抑制T细胞的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的激活并减少IFN-γ的数量，从而导致T细胞在肿瘤微环境中表现出低反应性。考虑到这些发现，表明在肿瘤环境中，TGFAP与肿瘤细胞形成共生关系。除了代谢原因之外，肿瘤微环境中还有许多其他触发Treg聚集的因素。肿瘤细胞和浸润性巨噬细胞可以分泌多种趋化因子（例如，CC趋化因子配体22（CCL 22）/CC趋化因子受体4（CCR 4）[81]和CXC基序趋化因子12（CXCL 12）/CXC趋化因子受体4（CXCR4）[82]）来募集TcB。此外，在肿瘤环境中富集的DC和一些抑制因子（包括IL-10、TGF-β和IDO）能够将Teff转化为CD 4+ CD 25+FOXP 3+ T细胞并扩增胸腺来源的Teff。6. 肿瘤相关性甲状腺肿的独特特征提高对肿瘤浸润性甲状腺肿的独特特征的理解对于治疗益处是非常重要的。Plitas等人[83]发现，相对于正常乳腺实质（NBP）和外周血，肿瘤驻留T细胞表现出FOXP3+ T细胞的丰度增加和高度增殖此外，更先进的等级和更积极的形式的乳腺癌似乎含有一个高度存在的激活THBE与强大的抑制功能。纯化的CD 25hi CD 4+ T细胞和CD25136F. Xie等人/工程5（2019）132Teffs表明，肿瘤驻留的Teps和Teffs细胞的基因表达模式是不同的从外周血中分离的相应的细胞。详细的分析已经确定趋化因子（C-C基序）受体8（CCR 8）作为最稳健和差异表达的趋化因子受体在乳腺癌驻留TCR 4。Ccr 8/Foxp 3mRNA高表达率与无病生存率和总生存率显著降低相关;总之，这些发现表明CCR 8可能是抗肿瘤免疫治疗的一个有希望的靶点。在靶向结肠癌中的CCR8的后续研究中观察到的保护性抗肿瘤免疫力强烈表明了该受体的生物学重要性[84]。还发现了先前未涉及TcB生物学的几个基因由肿瘤TcB稳健地表达，例如黑素瘤抗原家族H1（MAGEH1）基因和CD 177。在平行研究中，De Simone等人[85]和Zheng等人[86]发现了一系列基因优先被肿瘤内TdR上调。值得注意的是，在上述所有三项研究中鉴定了31种不同的基因，包括CTLA-4、肿瘤坏死因子受体超家族成员4（OX 40）、GITR、4-1BB、TIGIT、ICOS和CD27。然而，由于这些细胞表面标志物也在一部分非肿瘤浸润性T细胞中表达，因此针对这些受体的抗肿瘤免疫治疗的功能结果仍不清楚。7. 抗肿瘤免疫治疗7.1. 与塔利班临床使用免疫检查点抑制剂，如CTLA-4、PD-1和PD-L1，可以在许多癌症类型中诱导稳健和持久的反应在接受伊匹单抗（一种CTLA-4阻断剂）治疗的肿瘤患者中，浸润肿瘤的T细胞数量减少[87，88]。此外，CTLA-4信号对于Teff和Teff两者都是必不可少的，使得治疗性抗CTLA-4抗体的施用不仅减弱Teff的免疫抑制功能，而且增强Teff应答[89]。此外，抗CTLA抗体的机制最近已经被越来越多的研究所挑战，这些研究表明这些抗体可以通过诱导抗体依赖性细胞毒性（ADCC）而不是通过阻断抑制性检查点来起作用。值得注意的是，在许多类型的癌症中，例如CRC，免疫抑制性T细胞因子可能在限制癌症进展中起关键作用;因此，在这些癌症中耗尽肿瘤浸润性T细胞因子可能是不可取的尚未确定抗PD-1抗体在阻断TcR中的作用。 在小鼠模型中，据报道，表达PD-1的TcR的抑制功能高于不表达PD-1的TcR [90]（图11）。 2）。图2. TGFAP在抗肿瘤免疫治疗中的多样性功能PI（3）K：磷脂酰肌醇3-激酶; PIP 3：磷脂酰肌醇（3，4，5）-三磷酸; OX 40 L：OX 40的配体; AKT：Akt丝氨酸/苏氨酸激酶1。F. Xie等人/工程5（2019）1321377.2. Treg抑制功能GITR和OX40是由TcB连续表达的共刺激分子。GITR和0X 40的激动性抗体能够在Teff活性增强后消除Teff的抑制功能[91值得注意的是，与肿瘤接种前或肿瘤接种后立即给予抗GITR mAb相比，当肿瘤大小生长超过一定范围时，GITR治疗显示出更好的结果[95]。针对GITR和OX40的策略目前正在进行临床试验。除了表面分子外，T细胞特异性依赖的信号是可用于控制Treg功能的潜在靶点例如，磷脂酰肌醇3-激酶（PI（3）K）是一种脂质激酶，据报道其在细胞增殖、存活和运动中起核心作用PI（3）K的失活已显示在人白血病中产生有希望的抗肿瘤活性[96]。在小鼠模型中，PI（3）K的阻断已被证明能够诱导各种实体瘤的消退[97]。另一种策略是下调Foxp3的表达，Foxp3是TcB的关键转录因子。慢病毒Foxp3shRNA已用于小鼠中用于此目的，并且递送导致Treg功能受限。此外，参与Foxp3翻译后修饰过程的分子也是很好的靶点。另一个问题是Foxp3表达的抑制可能引起不可避免的副作用。因此，Foxp3表达的抑制需要进一步研究。7.3. 特异性Treg耗竭CD25由Teffs高度表达，而Teffs可以在TCR刺激后瞬时表达CD25普遍认为IL-2在激活TcR和TcF中所起的双重作用限制了CD 25和IL-2阻断的临床应用。然而，各种研究人员已经证明了扩大抗CD 25/IL-2mAb效用的潜力。Levin等人[98]发现，与IL-2相比，遗传修饰的IL- 2不同的IL-2剂量也可能产生不同的结果。与低剂量IL-2治疗的令人失望的结果相反，转移性黑色素瘤和肾细胞癌患者中的高剂量IL-2给药通过在一小部分中产生完全的肿瘤消退而增加了人们对IL-2应用的信心。在许多其他患者中延长了无病间期[99]。抗CD25 mAb的作用目前仍有争议。达克珠单抗（一种靶向CD25的人源化IgG1单克隆抗体）联合DC疫苗接种治疗转移性黑色素瘤的结果令人失望，这是由于Teff和活化Teff消耗的联合作用[100]。有趣的是，在乳腺癌患者中，daclizumab和疫苗接种的组合产生了有利的临床反应，而没有严重的副作用[101]。此外，发现在小鼠接种肿瘤前给予抗CD25 mAb比肿瘤接种后给予抗CD25 mAb产生更有效的抗肿瘤应答[102]。环磷酰胺是一种广泛用于治疗癌症的烷化剂。癌症化疗它可以使DNA烷基化，导致DNA交联，从而有效地杀死增殖细胞.在携带PROb细胞（一种源自大鼠结肠癌的细胞系）的小鼠中，单次给予环磷酰胺可诱导大量CD4+ CD25+ T细胞丢失，从而延迟PROb肿瘤的生长[103]。高剂量环磷酰胺严重影响所有T细胞，而低剂量环磷酰胺长期选择性影响增殖性T细胞[104，105]。由于TdR的双重功能：肿瘤免疫逃逸和维持稳态，TdR的去除通常伴随严重的自身免疫性疾病。因此，如何实现特异性Treg耗竭已成为迫切需要解决的关键问题。CCR4是一个很好的靶点，因为它在TCF4上特异性表达。据报道，抗CCR4抗体能够选择性地消耗T细胞，同时增加CD4+和CD8+ T细胞的数量[106]。此外，大量证据表明，趋化因子及其受体在不同类型的肿瘤中是异质性的。实例包括胰腺癌中的CCR 8[107];乳腺癌中的CCR 4与CCL 22;卵巢癌中的CCR 4与CCL 22、CCR 10与CCL 28和CXCR 4与CXCL 12[108]。这些特异性表达的趋化因子的施用可导致选择性消耗Tcl3。值得注意的是，Teffs的耗竭不能再活化无反应性T细胞，这表明为了重塑抗肿瘤免疫力，Teffs的耗竭和Teffs的再引发需要组合[109]。8. 结论FOXP3+ Treg是哺乳动物免疫系统的重要组成部分，在维持免疫稳态中起关键作用。越来越多的数据表明，FOXP3+ TGFAP可能是我们免疫系统的有效抑制剂来杀死肿瘤细胞。近年来，涉及耗尽Tregs介导的免疫抑制的肿瘤免疫疗法在临床上似乎是有效的。然而，总的来说，在能够使用抗肿瘤免疫疗法治愈大多数人类癌症患者之前还有很长的路要走。例如，尚未确定一种非常有效的策略，可以特异性地消耗肿瘤中的TdR而不会引起有害的副作用。在炎症驱动的肿瘤进展的情况下，肿瘤组织浸润的T细胞的确切作用及其功能可塑性和不稳定性需要进一步研究。更详细的功能研究是必要的，以加深我们对肿瘤组织浸润性THP的理解。正在探索分析肿瘤微环境中所涉及的活细胞的替代方法，例如单细胞测序技术的应用;这些新出现的数据将极大地促进我们对人类肿瘤的理解，并有助于开发新的抗肿瘤治疗方法。遵守道德操守准则谢峰、梁瑞、李丹和李斌声明，他们没有利益冲突或财务冲突需要披露。引用[1] Prise KM，O'Sullivan JM.癌症治疗中辐射诱导的旁观者信号传导。Nat RevCancer2009;9（5）：351-60.[2] Hodi FS，O'Day SJ，McDermott DF，Weber RW，Sosman JA，Haanen JB，等.易普利姆玛改善转移性黑色素瘤患者的生存率。新英格兰医学杂志2010;363（8）：711-23。[3] Topalian SL，Hodi FS，Brahmer JR，Gettinger SN，Smith DC，McDermottDF ，et al. 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